方法名称: |
车前草—高车前甙含量测定—HPLC法 |
应用范围: |
车前草中高车前甙含量测定 |
方法原理: |
车前草经甲醇超声提取,经液相色谱仪分离,在250nm 处测定峰面积,标准曲线法计算高车前甙含量。 |
仪器设备及实验条件: |
仪器设备 LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津);SPD-10A紫外检测器;C-R7A数据处理机;USA7512进样器(定量管20μL) 色谱条件 色谱柱:Nucleosil7-C18(4.6mm×250mm);紫外检测波长:335nm;流动相:甲醇-水-1.0mol/L pH3.5磷酸盐缓冲液(40∶55∶5,v/v);柱温:45℃;流量:1.0mL/min-1;纸速2mm/min |
试样制备: |
对照品溶液制备 精密称取高车前甙对照品约5mg置25ml量瓶中,加入适量甲醇溶解后再稀释至刻度,,摇匀,则成高车前甙标准液(0.2mg/mL)。在10.00~0.312μg/mL浓度范围内用流动相稀释成系列浓度标准溶液。 供试品溶液制备 车前草细粉约1.0g,置于磨口锥形瓶中,精密加入甲醇10ml,称重,置超声振荡器中2.0h,称重,补加甲醇至原重,过滤,弃去初滤液,收集续滤液,精密量取续滤液1.0mL置于10mL量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀,即得。 |
操作步骤: |
精密吸取供试品溶液20μl注入液相色谱仪,标准曲线法计算高车前甙含量。 裴云萍,吴正红,方芸.高效液相色谱法测定车前草中高车前甙的含量.中成药.1999,21(7):370-372 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
裴云萍,吴正红,方芸.高效液相色谱法测定车前草中高车前甙的含量.中成药.1999,21(7):370-372 |