方法名称： |
车前草--乌索酸和齐墩果酸含量测定—HPLC法 |
应用范围： |
车前草药材的质量控制 |
方法原理： |
车前草经乙醇超声提取，经液相色谱仪分离，在210nm 处测定峰面积，标准曲线法计算乌索酸和齐墩果含量。 |
仪器设备及实验条件： |
色谱条件 色谱柱：Nova – Pak C18柱(3.9mm ×300mm,4μm,带保护柱)；流动相：甲醇-水(88:12,V /V ) ,流速为0.8ml/min；柱温：25℃；检测波长：210nm。 仪器设备 美国Waters515双泵型高效液相色谱仪，2996光电二极管矩阵检测器，77251进样阀，20μl定量环，Enpower中文色谱管理系统 |
试样制备： |
对照品溶液的配制 精密称取干燥至恒重的乌索酸对照品22.8mg和齐墩果酸对照品7.8mg,置于10ml容量瓶中，加入适量甲醇溶解并定容,得对照品储备液。精密吸取1ml储备液置10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，混合均匀，制成乌索酸和齐墩果酸的浓度分别为0.228μg/μl和0.078μg/μl对照品混合溶液，备用。 样品溶液的制备 将烘干研细的车前草粉末精密称取约4g，置于具塞三角烧瓶中，加入10倍量95%乙醇，采用超声法提取60min，过滤，药渣洗涤两次，合并滤液于50ml容量瓶中，加乙醇定容至刻度，摇匀。滤液用0.2μm的滤膜过滤,，即得。 |
操作步骤： |
测定精密吸取车前草样品溶液10μl，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，外标法计算样品中乌索酸和齐墩果酸的含量。 |
附件： |
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备注： |
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参考文献： |
邹盛勤.车前草中乌索酸 |
