方法名称: |
草乌--乌头碱含量测定—HPLC法 |
应用范围: |
适用于生药、饮片、药酒中乌头碱的检测 |
方法原理: |
样品经乙醚超声提取,经液相色谱仪分离,在230nm处测定峰面积,标准曲线法计算含量。 |
仪器设备及实验条件: |
仪器设备 Waters 600E HPLC系统,966PDA检测器 色谱条件 色谱柱:XterraTMRP18柱(4.6mm×150mm,5μm); XterraTMRP18(3.0mm×20mm)保护柱。流动相:乙腈-10mM碳酸氢铵缓冲(pH10.5)。流速1.0ml/min。检测波长230nm。 |
试样制备: |
标准曲线的制备 精密称取乌头碱2.5mg于5ml容量瓶中,加乙腈溶解,稀释至刻度。在选定的色谱条件下分别取对照品溶液10μl、20μl、30μl、40μl、50μl进样,测定乌头碱峰面积值,重复进样3次,以峰面积值对乌头碱量做标准曲线。 供试品溶液制备 取河北产生草乌粉末,精密称定0.52g置于试管中,加0.5ml 10%氨水润湿,加入乙醚10ml,超声振荡30分钟,密塞,放置过夜,滤过。残渣用乙醚洗3次,合并醚液,40℃水浴挥干。残渣加1ml流动相溶解,过滤膜,即得。 |
操作步骤: |
精密吸取试品溶液50μl,按上述色谱条件测定,标准曲线法计算样品中乌头碱的含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
王朝虹,何毅,张继宗等.高效液相色谱法测定草乌中乌头碱含量.刑事技术.2003(1):15-16 |