方法名称: |
草乌类药用植物--活性成分含量测定—HPLC法 |
应用范围: |
对草乌类植物进行质量与资源评价 |
方法原理: |
样品以乙醚提取,液相色谱分离,在240nm处测定峰面积,外标法计算含量。 |
仪器设备及实验条件: |
仪器设备 Shimadzu LC-10A高效液相色谱仪(日本,包括LC-0ATvp溶剂输送泵,SCL-10Avp系统控制器,SPD-10Avp/10AVvp紫外-可见检测器,CTO-10ASvp柱温箱,DGU-12A在线真空脱气机,Class-up工作站;AS3120A Ultrasonic Cleaner;KL-009袖珍数显笔式酸度计。 色谱条件 色谱柱:Phenomenex ODS 柱(4.6mm ×250mm,5μm);流动相:乙腈-醋酸铵缓冲溶液(pH10.5)(54∶46);流速:1.0mL/min;检测波长:240nm;柱温为30℃。 |
试样制备: |
对照品溶液的制备 精密称取对照品适量,用乙腈配制成中乌头碱0.07g/L、乌头碱0.034g/L、次乌头碱0.62g/L的混合标准溶液。 供试样品溶液的制备 精密称取每个样品400mg,置于磨口的三角瓶中,加入014mL10%的氨溶液,搅拌均匀,加入10mL乙醚,超声30min后在补加5mL乙醚,放置过夜,过滤,分别用5mL的乙醚洗涤3次滤渣,合并醚液,挥干,用乙腈洗涤残渣定容为5mL,冷藏备用。 |
操作步骤: |
吸取对照品溶液和供试品溶液10μL,在上述色谱条件下,注入液相色谱仪测定,外标法计算含量。 |
附件: |
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备注: |
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参考文献: |
赵英永,崔秀明,戴云等.高效液相色谱法测定草乌类药用植物活性成分含量.中国药学杂志.2007,42(11):815-818 |