用转录因子提高长春花毛状根萜类吲哚生物碱含量的方法
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公开(公告)号
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CN1807631A
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公开(公告)日
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2006.07.26
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申请(专利)号
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CN200610023234.3
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申请日期
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2006.01.12
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专利名称
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用转录因子提高长春花毛状根萜类吲哚生物碱含量的方法
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主分类号
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C12N15/29(2006.01)I
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分类号
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C12N15/29(2006.01)I;C12N15/82(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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上海交通大学
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发明(设计)人
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唐克轩;龚一富;廖志华;苗志奇;孙小芬
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地址
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200240上海市闵行区东川路800号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海交达专利事务所
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代理人
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王锡麟;王桂忠
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种用转录因子提高长春花毛状根萜类吲哚生物碱含量的方法，其特征在于，从长春花中克隆orca3和g10h基因，构建含所述DNA分子的植物表达载体，用发根农杆菌介导，将orca3和g10h基因同时导入长春花细胞并再生出毛状根，PCR和荧光定量PCR检测外源目的基因orca3和g10h的整合和表达情况，液相色谱测定长春花毛状根中生物碱含量。
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摘要
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本发明是一种生物技术领域的用转录因子提高长春花毛状根萜类吲哚生物碱含量的方法。本发明从长春花中克隆str和g10h基因，构建含str和g10h基因的植物表达载体，遗传转化长春花获得转基因长春花毛状根，液相色谱法测定长春花毛状根中生物碱含量，荧光定量PCR测定长春花毛状根生物碱生物合成相关基因的表达。本发明获得的转基因长春花毛状根中重要生物碱的含量显著提高，其中长春碱含量比非转化对照根提高了234倍，从而提供了一种提高长春花毛状根生物碱的方法，也为生产具重要临床需求的抗癌药物长春碱和长春新碱提供了一种新方法。
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国际公布
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