| 公开(公告)号 | CN1243822C |
| 公开(公告)日 | 2006.03.01 |
| 申请(专利)号 | CN03138980.5 |
| 申请日期 | 2003.08.05 |
| 专利名称 | 一种抗SARS病毒真菌的培养方法 |
| 主分类号 | C12N1/14(2006.01)I |
| 分类号 | C12N1/14(2006.01)I;A01G1/04(2006.01)I;A61K36/074(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 莱阳农学院 |
| 发明(设计)人 | 宋爱荣;隋方功;赵 晨;田雪梅 |
| 地址 | 265200山东省莱阳市文化路65号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 济南三达专利事务所 |
| 代理人 | 李健康 |
| 国省代码 | 山东;37 |
| 主权项 | 一种抗SARS病毒真菌的培养方法，其步骤顺序如下：(1)菌种选择：选用多孔菌(Polyporales)中灰树花(Grifolafrondosa)、灵芝(Ganodermalucidum)、桑黄(Phellinusignirius)、薄树灵芝(Ganodermacapense)、香栓菌(Trametessuaveloens)之一；(2)斜面培养：将上述菌株接种于pH值调整为3～12的固体斜面培养基上，15～30℃条件下培养菌体2～5天；(3)一级种子培养：将步骤(2)培养的菌株，无菌条件下用接种针取1～10块每块大小为1cm2的斜面培养菌种块，加入每瓶装有100～300ml液体培养基的500mL三角摇瓶内，pH值调整为3～12，15～30℃条件下，在旋转摇床上培养，转速80～220r/min，培养5～10天，制得一级种子；(4)扩大培养：以体积比为液体培养基1/10～1/20的接种量，接一级种子于装有10～20L液体培养基的30L种子罐内，pH值调整为3～12，15～30℃条件下培养，搅拌速度为120～220r/min，通气量为1∶(0.2～1.5)v/vmin，罐压控制在0.2～0.5Kg/cm2，培养时间为3～10天，制得二级种子；(5)发酵罐培养：以体积比为液体培养基1/10～1/20的接种量，接二级种子于装有200～300L液体培养基的500L的发酵罐内，pH值调整为3～12，15～30℃条件下培养，搅拌速度为160～220r/min，通气量为1∶(1.0～1.5)v/vmin，罐的压力控制在0.3～0.6Kg/cm2，培养时间为5～10天，即得包括菌丝体与澄清液的多孔菌菌丝体液体培养悬浮液；(6)收集菌体：在5000转/分条件下离心5～8分钟，收集步骤(5)制得的菌体，并用生理盐水洗涤2～3次；再将菌体置于20～100mmol/L的磷酸钾缓冲液中，调节pH至7～9，测定真菌菌株液体发酵生物量：菌球数量以个/100ml计，菌丝体鲜重以g/100ml计，菌丝体干重以g/100ml计；上述所用固体斜面培养基或液体培养基配方是：1000毫升蒸馏水中加入谷物类淀粉或玉米面或黄豆粉或马铃薯淀粉或麸皮5～30克、酵母膏或酵母粉1～10克、蛋白胨1～20克、磷酸二氢钾0.1～2克、硫酸镁0.1～5克、葡萄糖或蔗糖10～40克；pH值调整为3～12。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种抗SARS病毒真菌的培养方法，该方法包括(1)菌种选择，(2)斜面培养，(3)一级种子培养，(4)扩大培养，(5)发酵罐培养，(6)收集菌体等步骤；该方法具有工艺简便、生长量大、得率高、成本低廉的特点，并且利用本发明培养的多孔菌所提取的粗提物对SARS病毒具有完全的抑制作用，具有很好的社会效益和应用前景。 |
| 国际公布 |
