冬凌草甲素标准用对照品的分离制备工艺
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公开(公告)号
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CN1712401A
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公开(公告)日
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2005.12.28
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申请(专利)号
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CN200510018540.3
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申请日期
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2005.04.13
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专利名称
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冬凌草甲素标准用对照品的分离制备工艺
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主分类号
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C07D311/02
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分类号
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C07D311/02;G01N30/90
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国科学院武汉植物园
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发明(设计)人
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王有为;卢笑丛;龚复俊;崔慧芳;葛 建;陈 玲
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地址
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430074湖北省武汉市武昌区磨山
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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武汉开元专利代理有限责任公司
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代理人
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朱盛华
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国省代码
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湖北;42
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主权项
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冬凌草甲素标准用对照品的分离制备工艺，其特征在于按如下步骤进行：A、含量大于90％的冬凌草甲素粗结晶用20～40倍甲醇热处理，按重量比粗结晶∶柱层析硅胶＝1∶0.3～1∶0.5将粗结晶与200～300目柱层析硅胶拌混均匀，置于温度低于50℃、通风的环境中干燥，B、取重量是拌样硅胶8～12倍的200目～300目新鲜硅胶装柱，再将拌样硅胶置于其上，用5～8倍柱中硅胶体积的石油醚洗涤前杂，再用4∶1～8∶3的石油醚、丙酮混合溶剂梯度解吸，C、收集富含冬凌草甲素的流份，用薄层层析法展开，以10％～50％硫酸乙醇显色，到冬凌草甲素层析斑点显色不明显时停止解吸，解吸液在温度为50℃、真空度0.6～0.8Mpa条件下浓缩，浓缩液出现浑浊时停止，D、浓缩液在-4℃～4℃静置2到4h结晶，减压抽滤，使冬凌草甲素晶体与母液分离，母液继续减压浓缩至出现浑浊，再静置结晶，重复数次直至从母液中不再析出冬凌草甲素结晶，E、合并冬凌草甲素结晶，用10～15倍的丙酮、甲醇混合溶剂进行重结晶精制，所获结晶用高效液相色谱仪测定冬凌草甲素纯度达到99.5％以上，即为冬凌草甲素标准对照品，丙酮、甲醇混合液二者的体积比为丙酮∶甲醇＝1∶8～1∶3。
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摘要
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冬凌草甲素标准用对照品的分离制备工艺，涉及一种从冬凌草中制备冬凌草甲素标准对照品的方法。将粉碎的冬凌草进行回流提取，提取液浓缩得稠膏状提取物，脱脂后上硅胶柱层析，解吸，减压浓缩，静置结晶，得含量大于90％的冬凌草甲素粗结晶。粗结晶用甲醇溶解，上硅胶柱层析，用石油醚洗涤前杂，再以石油醚、丙酮混合溶剂进行梯度解吸，合并富含冬凌草甲素流份的解吸液，浓缩结晶，减压抽滤，使晶体与母液分离，母液继续浓缩结晶，依此法重复操作多次，直至母液中再无结晶析出。合并结晶，以丙酮、甲醇混合溶剂进行重结晶精制，得纯度达99.5％以上的冬凌草甲素标准对照品。本发明所用溶剂量少，成本低廉，适于实验室小规模制备。
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国际公布
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