新型抗肿瘤人参皂苷的制备方法
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公开(公告)号
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CN1230553C
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公开(公告)日
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2005.12.07
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申请(专利)号
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CN02144779.9
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申请日期
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2002.12.13
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专利名称
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新型抗肿瘤人参皂苷的制备方法
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主分类号
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C12P33/00
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分类号
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C12P33/00
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国科学院大连化学物理研究所
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发明(设计)人
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杨 凌;何克江;韩 蔚;吴 磊
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地址
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116023辽宁省大连市中山路457号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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沈阳晨创科技专利代理有限责任公司
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代理人
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张 晨
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国省代码
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辽宁;21
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主权项
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一种用酶水解人参二醇型皂苷制备3位羟基游离的低极性人参皂苷：20-O-β-D-木糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(s)-原人参二醇[20-O-β-D-xylopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxadiol，简称Mx]、20-O-α-L-阿拉伯糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(S)-原人参二醇[20-O-α-L-arabinopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl20(S)-protopanaxadiol，简称C-Y]或20-O-α-L-阿拉伯糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(S)-原人参二醇[20-O-α-L-arabinofuranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl20(S)-protopanaxadiol，简称Mc]的方法，包括水解、产物收集和酶回收利用步骤，用蜗牛酶在缓冲液中分别选择性水解人参皂苷Rb3制备Mx，人参皂苷Rb2制备C-Y或人参皂苷Rc制备Mc，其特征在于：皂苷与蜗牛酶的重量比为1∶1～10∶1，温度为30～45℃，pH3.0～5.5，水解时间2小时～3天，产物收集方法是酶法或微生物发酵法：a)酶法收集酶反应沉淀物，制成悬浊液；乙酸乙酯萃取三次，合并乙酸乙酯液，减压回收乙酸乙酯后，收集的残余物即为Mx、C-Y或Mc；若原料为含有Rb3、Rb2和Rc的植物、植物提取物或植物培养液，所获粗产物还需经吸附树脂纯化；b)微生物发酵法用水饱和的正丁醇提取培养基三次，合并正丁醇提取液，活性炭去色除臭，减压浓缩回收正丁醇，残余物溶于乙酸乙酯并用硅胶柱层析和反相层析纯化后获Mx、C-Y或Mc。
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摘要
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本发明涉及酶解或微生物发酵水解人参皂苷制备3位羟基游离的低极性人参皂苷：20-O-β-D-木糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(s)-原人参二醇[20-O-β-D-xylopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxadiol，简称Mx]、20-O-α-L-阿拉伯糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(S)-原人参二醇[20-O-α-L-arabinopyranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl 20(S)-protopanaxadiol，简称C-Y]和20-O-α-L-阿拉伯糖(1→6)-β-D-葡萄糖-20(S)-原人参二醇[20-O-α-L-arabinofuranosyl(1→6)-β-D-glucopyranosyl 20(S)-protopanaxadiol，简称Mc]的方法，特别是涉及粗蜗牛酶水解制备方法。本发明中所用蜗牛酶酶活性高、选择性好、离子强度要求低、抗失活能力强、来源方便、价格低廉，用该酶制备Mx、C-Y或Mc工艺简单方便、成本低、回收率高，产品质量好，可以满足医药、化妆及功能食品领域的需求，应用和开发价值极大。
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国际公布
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