一种高效制备紫杉醇的方法
|
公开(公告)号
|
CN1227243C
|
|
公开(公告)日
|
2005.11.16
|
|
申请(专利)号
|
CN200410013559.4
|
|
申请日期
|
2004.02.18
|
|
专利名称
|
一种高效制备紫杉醇的方法
|
|
主分类号
|
C07D305/14
|
|
分类号
|
C07D305/14
|
|
分案原申请号
|
|
|
优先权
|
|
|
申请(专利权)人
|
东北林业大学;祖元刚
|
|
发明(设计)人
|
祖元刚;薛艳华;史 权;付玉杰;唐中华;祖柏实;韩 梅;刘丽娜
|
|
地址
|
150040黑龙江省哈尔滨市动力区和兴路26号
|
|
颁证日
|
|
|
国际申请
|
|
|
进入国家日期
|
|
|
专利代理机构
|
|
|
代理人
|
|
|
国省代码
|
黑龙江;23
|
|
主权项
|
一种制备紫杉醇的方法，其特征是：将鲜物料在温度为0～30℃条件下避光放置1～15天后，在温度为20～29℃条件下进行匀浆空化生物半合成，得匀浆液再经负压空化混旋生物半合成及负压空化混旋两相培养处理；静置分液，有机相浓缩至干，水相过滤得水相滤液，滤渣加入提取溶媒进行负压空化混旋固液萃取；合并空化混旋萃取液，经减压浓缩后回收提取溶媒得浓缩液，浓缩液与有机相浓缩物及水相滤液合并，加入柠檬酸或食草动物的胆汁经负压空化混旋处理，冷冻浓缩；浓缩物加入等体积甲醇溶解，缓慢置入等体积乙腈中，离心，得离心液，经活性炭静置脱色，过滤得无色液体，用乙酸乙酯进行等体积萃取，萃取液水洗至中性，减压浓干，浓缩物用乙腈溶解，沉淀析出，过滤得10-脱乙酰基巴卡亭III粗品，母液浓缩分别经氧化铝柱层析和制备型高效液相层析及重结晶得紫杉醇晶体，所述的鲜物料包括榛子、南方红豆杉、东北红豆杉、曼地亚红豆杉、云南红豆杉的茎皮、根或枝叶；所述的匀浆空化生物半合成是指将鲜物料置于匀浆机中，加入含有半合成前体或诱导子或混合糖原的生物半合成培养液，匀浆3～30分钟，温度：20～29℃，料液比：1∶4～1∶15，其中半合成前体为醋酸钠、苯丙氨酸和苯甲酸钠，诱导子为水杨酸、赤霉酸、硝酸银、甲基茉莉酮酸、花生四烯酸、柠檬酸铵及茉莉酸甲酯，混合糖源为蔗糖与麦芽糖；所述的生物半合成培养液为水或pH值为4.0～5.8的磷酸缓冲液或B5培养液；所述的负压空化混旋生物半合成是将匀浆液置于负压空化罐中，其条件是温度为20～29℃，时间2～5天，每间隔3～4小时空化一次，每次5～30分钟，其底部进气的气体类型包括空气、氢气、氧气、二氧化碳、氮气，通气量为1～3m3/min；所述的负压空化两相培养，有机相包括油酸、邻苯二甲酸，在培养体系中的体积分数为0.04～0.5；所述的提取溶媒为50～95％乙醇、甲醇、丙酮或体积比为1∶1的丙酮∶乙酸乙酯或体积比为80∶19∶1的乙醇∶水∶柠檬酸；所述的柠檬酸浓度为0.1～2％，食草动物的胆汁浓度为10～50％；所述的负压空化混旋固液萃取，其条件为料液比1∶5～1∶20，在空化罐中空化10～30分钟，通气量为2～4m3/min，重复2～3次。
|
|
摘要
|
本发明涉及一种高效制备紫杉醇的方法。其特征在于将鲜物料进行匀浆空化生物半合成，再经负压空化混旋生物半合成及负压空化混旋两相培养处理；有机相浓缩至干，水相过滤得水相滤液，滤渣加入溶媒进行负压空化混旋固液萃取，合并萃取液，浓缩后与有机相浓缩物及水相滤液合并，加入柠檬酸或食草动物的胆汁经负压空化混旋处理，冷冻浓缩；浓缩物加入甲醇溶解，置入乙腈中，离心，活性炭脱色，得液体用乙酸乙酯萃取，萃取液水洗至中性，减压浓干。浓缩物用乙腈溶解，沉淀析出10-脱乙酰基巴卡亭III，母液浓缩分别经氧化铝柱层析和制备型高效液相层析及重结晶得紫杉醇晶体。
|
|
国际公布
|
|
...
