公开(公告)号
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CN1977970A
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公开(公告)日
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2007.06.13
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申请(专利)号
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CN200610048874.X
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申请日期
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2006.12.06
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专利名称
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一种混合床凝胶过滤层析技术用于病毒性疫苗纯化的方法
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主分类号
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A61K39/12(2006.01)I
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分类号
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A61K39/12(2006.01)I;C12N7/02(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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云南沃森生物技术有限公司
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发明(设计)人
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黄 镇;向左云
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地址
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650106云南省昆明市高新区云南省大学科技园2期A3幢4楼
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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昆明正原专利代理有限责任公司
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代理人
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刘明哲
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国省代码
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云南;53
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主权项
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一种混合床凝胶过滤层析技术用于病毒性疫苗纯化的方法,其步骤是: (1)采用组织培养技术或重组DNA技术收获病毒抗原; (2)取Sepharose 4FF和Sepharose 6FF凝胶,Sepharose 4FF凝胶与Sepharose 6FF凝胶混合的体积比为0.05∶1~20∶1,充分混匀后装填于柱中; (3)用0.1~0.5mol/L NaOH,以线流速10-100cm/h去除内毒素,维持时间2-10小时; (4)用含0.02~0.50mol/L氯化钠或氯化钾的平衡缓冲液平衡柱子; (5)对需要纯化病毒抗原,用截留分子量10~300kD的超滤膜进行超滤浓缩; (6)将浓缩后溶液上样于充分平衡的Sepharose 4 FF-Sepharose 6FF混合床柱,上样量为1~15%柱体积,洗脱液与平衡缓冲液相同; (7)分部收集,进行相应指标测定。
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摘要
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本发明一种混合床凝胶过滤层析技术用于病毒性疫苗纯化的方法,属于生物技术领域,其步骤为,将Sepharose 4FF凝胶与Sepharose 6 FF凝胶充分混匀后装填于柱中,将超滤浓缩后的病毒抗原上样于混合床柱进行凝胶过滤层析,获得纯化的病毒抗原。本发明提供了一种纯化效果好、抗原回收率高的病毒抗原纯化新方法,纯化的病毒抗原适合于制备疫苗。
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国际公布
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