公开(公告)号
|
CN1320117C
|
公开(公告)日
|
2007.06.06
|
申请(专利)号
|
CN200510050844.8
|
申请日期
|
2005.07.22
|
专利名称
|
脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体及构建
|
主分类号
|
C12N15/62(2006.01)I
|
分类号
|
C12N15/62(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I
|
分案原申请号
|
|
优先权
|
|
申请(专利权)人
|
浙江大学
|
发明(设计)人
|
赵同峰;谷 卫;詹宇红;赵江佩
|
地址
|
310027浙江省杭州市西湖区浙大路38号
|
颁证日
|
|
国际申请
|
|
进入国家日期
|
|
专利代理机构
|
杭州求是专利事务所有限公司
|
代理人
|
赵杭丽;张法高
|
国省代码
|
浙江;33
|
主权项
|
人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合基因的cDNA序列,其特征是:全长共567个bp,1-15bp编码肠激酶识别序列,16-108bp编码人胰升糖素样肽-1类似肽(Glucagons-like Peptide-1Analogues,GLP-1-A),序列长93bp,其中19-21bp将人胰升糖素样肽-1(7-37)[Glucagons-like Peptide-1(7-37),GLP-1(7-37)]编码基因中编码第8位氨基酸丙氨酸的密码子GCT突变为甘氨酸密码子GGT,109-153bp编码接头肽DNA序列,序列长45bp,154-564bp编码脂联素,序列长411bp,565-567bp为终止密码子,该融合基因cDNA序列见SEQ ID NO 1。
|
摘要
|
本发明公开了人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体及构建方法。本发明运用PCR技术获得人脂联素和GLP-1-A编码基因,脂联素基因通过扩增脂联素球状域基因获得,通过将人GLP-1(7-37)编码基因中编码第8位氨基酸丙氨酸的密码子突变为甘氨酸密码子获得GLP-1-A编码基因,运用酶切技术,将GLP-1-A和脂联素编码基因定向克隆到表达载体,获得人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体,经转化蛋白表达细菌表达出了含肠激酶识别序列的人Adiponectin-GLP-1-A融合蛋白,本发明为进一步研究其活性,测定融合蛋白上GLP-1-A半衰期,得到能促进胰岛β细胞分泌胰岛素、能改善胰岛素抵抗、副作用小的新蛋白提供良好的前期研究。
|
国际公布
|
|