一种动物源细菌氯霉素类药物耐药基因多重PCR检测技术
公开(公告)号
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CN1966718A
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公开(公告)日
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2007.05.23
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申请(专利)号
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CN200610022075.5
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申请日期
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2006.10.20
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专利名称
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一种动物源细菌氯霉素类药物耐药基因多重PCR检测技术
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主分类号
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C12Q1/68(2006.01)I
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分类号
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C12Q1/68(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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四川大学
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发明(设计)人
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王红宁;杨 鑫;张安云;周万蓉;吴 琦;夏青青;田国宝
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地址
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610064四川省成都市望江路29号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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四川;51
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主权项
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一种动物源细菌氯霉素类药物耐药基因多重PCR检测技术,含有PCR模板制备试剂和细菌耐药基因多重PCR扩增试剂,其特征在于:所述PCR模板制备试剂是由洗涤液、样品处理液组成,所述细菌耐药基因多重PCR扩增试剂包括10倍PCR缓冲液组分为50mM KCl、pH8.3的10mM Tris.HCl和0.01%明胶,浓度均为2.5mmol/L的dGTP、dCTP、dATP和dTTP,浓度为25mM/LMgCl2,三种耐药基因即Cat1基因、FloR基因和CmlA基因的特异性上下游引物浓度均为25mmol/L,浓度为2.5U/ULTaq DNA聚合酶和超纯水。所述动物源细菌氯霉素类药物耐药基因多重PCR扩增试剂各组分的终浓度如下:1倍PCR缓冲液,dGTP、dCTP、dATP和dTTP的终浓度均为0.25mmol/L,MgCl2的终浓度为2.5mM/L,氯霉素类药物耐药基因Cat1、FloR、CmlA的终浓度分别为0.2mmol/L、0.4mmol/L、0.9mmol/L,Taq DNA聚合酶的终浓度为1.75U/100UL。
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摘要
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本发明涉及一种动物源细菌氯霉素类药物耐药基因多重PCR检测技术法,该方法包括扩增待测细菌耐药基因的三对PCR引物以及PCR模板制备试剂和细菌耐药基因多重PCR扩增试剂,利用该多重PCR检测技术能扩增待测菌株氯霉素类药的耐药基因。它具有灵敏度高、特异性高、应用范围广,结果准确可靠的特点。
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国际公布
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