公开(公告)号 | CN1952179A |
公开(公告)日 | 2007.04.25 |
申请(专利)号 | CN200610140463.3 |
申请日期 | 2006.10.09 |
专利名称 | 一种检测白介素-6基因启动子区多态性位点的方法 |
主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国人民解放军总医院 |
发明(设计)人 | 田亚平;贾兴旺;邓心新;汪德清;董振南 |
地址 | 100853北京市复兴路28号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 北京君智知识产权代理事务所 |
代理人 | 向 华 |
国省代码 | 北京;11 |
主权项 | 一种检测白介素-6基因启动子区多态性位点的方法,它包括下述步骤: (1)设计用于扩增含白介素-6基因-597G/A,-572G/C两位点的DNA片段的引物: 正向引物:5’-AAAGGAGTCACACACTCC-3’; 反向引物:5’-GCGTTCCAGTTAATTTGTATTTG-3’; (2)设计分别用于检测白介素-6基因启动子区-597G/A,-572G/C两位点的探针,并用不同的荧光素分别标记所述的两对探针: 用于检测白介素-6基因启动子区-597G/A位点的探针为: 检测探针:5’-CTGCCTGGCCACCCTCA-3’; 锚定探针:5’-LC-Red 640-TTTCGTGCAGTTACTTCAAGGCGTCTCCAGG-3’; 用于检测白介素-6基因启动子区-572G/C位点的探针为: 检测探针:5’-ACAACAGCCCCTCACAGG-3’; 锚定探针:5’-LC-Red 705-GAGCCAGAACACAGAAGAACTCAGATGACTG-3’; (3)PCR扩增,并进行荧光检测; (4)描绘熔点曲线; (5)根据得到的特征性熔点曲线,判断待测样品的基因型; (6)对所述的待测样品的基因型进行测序验证。 |
摘要 | 本发明提供了一种检测白介素-6基因启动子区多态性位点的方法,它运用实时荧光PCR仪结合熔点分析在同一反应体系中实现了同时对白介素-6基因启动子区-572G/C,-597G/A两位点多态性的检测。本发明所述的方法与直接测序的检测方法相比,操作简单,成本低廉,结果判断直观,反应快速,并且每一反应都是闭管进行,有效减少了PCR污染的风险。 |
国际公布 |