公开(公告)号 | CN1952176A |
公开(公告)日 | 2007.04.25 |
申请(专利)号 | CN200610096455.3 |
申请日期 | 2006.09.27 |
专利名称 | 从胸、腹水中提取游离mRNA的方法 |
主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I;C07H21/02(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
发明(设计)人 | 刘宝瑞;王立峰;钱晓萍 |
地址 | 210008江苏省南京市中山路321号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 南京中新达专利代理有限公司 |
代理人 | 孙 鸥 |
国省代码 | 江苏;32 |
主权项 | 从胸、腹水中提取游离mRNA的方法,其步骤在于: (1)将胸水或腹水注入有枸橼酸钠溶液的无RNA酶抗凝管中; (2)上离心机离心,吸取上清至新管,再离心,吸取三分之二上清至新管; (3)取上清加入到Trizol LS溶液中,室温震荡; (4)向其中加入氯仿,剧烈震荡后室温下放置; (5)上离心机离心,吸取水相层至新管; (6)加入异丙醇,沉淀RNA; (7)上离心机离心,75%乙醇洗涤后晾干; (8)加入无RNA酶水,溶解RNA,以其为模板,常规技术反转录为cDNA保存。 |
摘要 | 本发明涉及一种从胸、腹水中提取游离mRNA的方法。本发明将胸或腹水注入有枸橼酸钠溶液的无RNA酶抗凝管中,离心,吸取上清,再离心,再吸取上清,上清加入到Trizol LS溶液中,室温震荡,加入氯仿,剧烈震荡后室温下放置,离心,吸取水相层至新管,加入异丙醇,沉淀RNA,离心,75%乙醇洗涤后晾干,加入无RNA酶水,溶解RNA,以其为模板,常规技术反转录为cDNA保存。解决了过去无法从胸、腹水中抽提RNA的缺陷,可以对肿瘤及其他疾病进行早期诊治。操作方便,重复性强。 |
国际公布 |