公开(公告)号
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CN1944462A
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公开(公告)日
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2007.04.11
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申请(专利)号
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CN200610104676.0
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申请日期
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2006.09.29
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专利名称
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抗PV IgY抗体制备及其用于PV诊断试剂和预防药物用途
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主分类号
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C07K16/02(2006.01)I
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分类号
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C07K16/02(2006.01)I;C07K16/08(2006.01)I;G01N33/53(2006.01)I;A61K39/395(2006.01)I;A61P31/18(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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西安交通大学
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发明(设计)人
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杨 军;张明娟;陈晓黎;苏宝山;王一理;司履生
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地址
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710049陕西省西安市咸宁路28号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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西安通大专利代理有限责任公司
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代理人
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李郑建
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国省代码
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陕西;61
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主权项
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一种抗PV IgY抗体的制备方法,其特征在于,具体包括下列步骤:(A)、PV抗原的制备: (a)选择PV即乳头瘤病毒感染所引起的乳头状瘤瘤体组织,通过物理、化学、生物方法进行破碎,分离PV病毒蛋白,并将上述一种或一种以上的相应PV病毒蛋白以任意比例混合,组成抗原混悬液; (b)上述PV病毒蛋白采用分子生物学方法通过常规的真核表达系统、原核表达系统、酵母表达系统、病毒表达系统即可获得PV L1、L2、E6、E7、E4、E5、E1或E2蛋白,并将上述一种或一种以上的相应PV病毒蛋白以任意比例混合,组成抗原混悬液; (c)上述PV病毒蛋白采用分子生物学方法制备可表达一种或一种以上PV L1、L2、E6、E7、E4、E5、E1、E2蛋白的真核表达载体,并将上述一种或一种以上的真核表达载体以任意比例混合,组成混悬液,作为基因免疫疫苗,通过基因免疫的方式产生相应PV抗原; (B)、免疫方法: (a)初次免疫用弗氏完全佐剂乳化的A(a)或A(b)步骤制备的抗原混悬液在雌性禽类动物胸部上的4个点分布式肌内注射注,2周后,用弗氏不完全佐剂乳化的A(a)或A(b)步骤制备的抗原混悬液进行第二次免疫,以后每隔30天左右加强免疫一次,免疫量同前;在初次免疫一周后,收集雌性禽类动物蛋,4℃下保存备用; (b)采用肌肉注射、基因枪的方法直接将A(c)步骤制备的可表达一种或一种以上PV L1、L2、E6、E7、E4、E5、L1、L2蛋白及其基因的真核表达载体注入雌性禽类动物体内,免疫雌性禽类动物,2周后,进行第二次免疫;以后每隔30天左右加强免疫一次,免疫量同前,在初次免疫一周后,收集雌性禽类动物蛋,4℃下保存备用。
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摘要
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本发明公开了一种抗PV IgY抗体的制备及其该抗PV IgY在制备PV相关疾病免疫诊断试剂和预防药物中的用途。抗PV IgY抗体是通过分子生物学方法获得不同类型的PV病毒蛋白或能表达上述蛋白的真核表达载体,将其作为PV病毒蛋白抗原或基因疫苗免疫雌性禽类动物,通过常规方法分离并纯化相应的抗PV IgY抗体,用于制备PV感染及相关疾病诊断试剂和预防药物。实验证明特异性抗PV IgY抗体具有特异性结合相应PV抗原的能力,可用于制备PV感染及相关疾病诊断试剂、分离和纯化相应PV抗原,用于预防PV感染药物的制备,并具有安全、副作用小、疗效显著等特点。
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国际公布
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