公开(公告)号
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CN1944673A
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公开(公告)日
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2007.04.11
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申请(专利)号
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CN200610044679.X
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申请日期
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2006.06.12
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专利名称
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乙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法及专用试剂盒
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主分类号
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C12Q1/68(2006.01)I
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分类号
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C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I;G01N33/96(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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山东省医药生物技术研究中心
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发明(设计)人
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鲁艳芹;韩金祥;王传玺;戚 鹏;沈忠林
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地址
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250062山东省济南市历下区经十路89号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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济南金迪知识产权代理有限公司
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代理人
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鲍光明
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国省代码
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山东;37
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主权项
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一种乙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法,包括引物和对应探针,乙肝病毒DNA的提取,对血清样本中提取的血清DNA进行荧光定量PCR扩增,对乙肝病毒的定量检测,其特征在于,所述引物和对应探针是源于乙肝病毒表面抗原S区的基因保守区域的探针和引物序列,上、下游引物和探针序列分别为: RSU:5’AGAATCCTCACAATACCGCAGAGT 3’ RSL:5’CACACGGTAGTTCCCCCTAGAA 3’ PS:5’FAM-AGACTCGTGGTGGACTTCTCTCAAT-TAMARA 3’。
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摘要
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乙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法及专用试剂盒,属于生物技术领域。本发明的方法是通过对乙型肝炎病毒表面抗原,核心抗原和E抗原区等三对不同的引物和探针的优化,筛选出了扩增效果最好的一对引物和探针。比较了用不同方法提取的血清DNA样本进行荧光定量PCR扩增时乙肝病毒拷贝数的变化,优化了乙肝病毒的提取方法。本发明采用优化的引物和探针以及简单的病毒DNA提取方法进行定量PCR检测,具有灵敏度高,特异性强,成本低廉,耗时短,检测准确等优点。本发明还提供了用于本发明方法的试剂盒。本发明可以用于临床及科研中对乙肝病毒患者血清HBV的定量检测,从而指导临床治疗。
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国际公布
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