公开(公告)号
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CN1308350C
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公开(公告)日
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2007.04.04
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申请(专利)号
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CN200410060650.1
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申请日期
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2004.07.28
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专利名称
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一种具有抗肿瘤活性的茯苓菌丝体胞外多糖的制备方法
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主分类号
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C08B37/00(2006.01)I
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分类号
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C08B37/00(2006.01)I;C12P19/04(2006.01)I;A61K31/715(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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武汉大学
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发明(设计)人
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张俐娜;金 勇;陈 莉;陈立国;张志强
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地址
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430072湖北省武汉市武昌珞珈山
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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武汉天力专利事务所
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代理人
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程 祥;冯卫平
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国省代码
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湖北;42
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主权项
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一种具有抗肿瘤活性的茯苓菌丝体胞外多糖的制备方法,其特征在于:采用华中农业大学提供的编号为P0的野生茯苓菌种(wolf Poria cocos)在pH值为5.0~6.0的玉米浆培养基中用经120-150℃蒸汽灭菌的发酵罐进行茯苓菌丝体深层发酵;培养温度25~30℃,罐内压力0.7~0.9Mpa,空气流量为发酵罐体积的0.5~1倍/分钟,搅拌速度120~200rpm;发酵48~72小时,然后空气流量加大到发酵罐体积的1~1.5倍/分钟;总共发酵7~10天,收集培养液;采用喷雾干燥机干燥得到胞外粗多糖,干燥机的入口温度250℃,出口温度70~80℃;用蒸馏水将胞外粗多糖溶解,过滤后用20~30wt% H2O2脱色,用Sevag法除去游离的蛋白质,反复进行9~12次,然后分别用清水和二次蒸馏水透析5~7天和3~5天,减压蒸馏,冷冻干燥得纯胞外多糖。
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摘要
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本发明涉及一种具有抗肿瘤活性的茯苓菌丝体胞外多糖的制备方法,采用野生茯苓菌种在pH值为5.0~6.0的玉米浆培养基中用经高压灭菌的发酵罐进行茯苓菌丝体深层发酵;收聚培养液;采用喷雾干燥机干燥得到胞外粗多糖;用蒸馏水将胞外粗多糖溶解,过滤后用H2O2脱色,用Sevag法除去游离的蛋白质,然后分别用清水和二次蒸馏水透析5~7天和3~5天,减压蒸馏,冷冻干燥得纯胞外多糖。体内活性实验表明,这种水溶性杂多糖对植入小鼠体内的Sarcoma 180肿瘤的生长具有明显的抑制作用,而且无毒副作用。体外活性实验表明,该类多糖对人体急性白血病毒细胞(HL-60)的增殖有显著的抑制效果,而且不会破坏正常猴肾细胞的生长。
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国际公布
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