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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:四价轮状病毒灭活疫苗的制备及应用专利检索:专利号/专利人/发明人
    

四价轮状病毒灭活疫苗的制备及应用

公开(公告)号 CN1306961C  
公开(公告)日 2007.03.28  
申请(专利)号 CN200510041858.3  
申请日期 2005.03.19  
专利名称 四价轮状病毒灭活疫苗的制备及应用  
主分类号 A61K39/15(2006.01)I  
分类号 A61K39/15(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 兰州生物制品研究所  
发明(设计)人 周 旭  
地址 730046甘肃省兰州市城关区盐场路178号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 兰州中科华西专利代理有限公司  
代理人 王学定  
国省代码 甘肃;62  
主权项 一种四价轮状病毒灭活疫苗的制备方法,包括以下工艺步骤: ①细胞的制备:将小牛肾细胞或Vero细胞用胰酶消化分散,加入D-MEM完全培养液在37℃培养至细胞成片,再用无血清D-MEM培养液清洗细胞,用于接种轮状病毒; ②病毒接种和培养:将G1型、G2型、G3型、G4型轮状病毒毒种加入10~15ug/ml胰酶,于37℃消化45分钟,以感染复数为5~10将G1型、G2型、G3型、G4型轮状病毒分别接种到步骤①制备的细胞,并在36.5-37.5℃吸附40~60分钟后吸弃病毒液,再用含1~1.5ug/ml胰酶的无血清D-MEM培养液于33~35℃培养至细胞出现明显病变时终止; ③病毒收集、浓缩和纯化:将上述接种的各病变细胞冻融,高速离心后收集上清液得各病毒原液;通过超滤浓缩上述病毒原液,并以蔗糖密度梯度离心或柱层析纯化病毒后即为各单价病毒原液; ④病毒灭活:采用0.05%福尔马林或1∶4000β-丙内酯灭活上述各单价病毒,除菌过滤后即为单价疫苗原液; ⑤混合上述各单价疫苗原液; ⑥成品的配制:将经混合的单价疫苗原液加入适量的氢化铝,即为成品。  
摘要 本发明涉及一种四价轮状病毒灭活疫苗的制备方法,该方法将胰酶消化分散的小牛肾细胞或Vero细胞培养成片后以不同的感染复数分别接种G1、G2、G3、G4型轮状病毒,用无血清D-MEM培养液至细胞出现明显病变后收获病毒液并经浓缩、纯化、灭活、混合后加入适量的氢氧化铝制备而成。本发明制备的四价轮状病毒灭活疫苗经动物实验证明具有良好的免疫原性;经无菌试验、病毒滴定、灭活试验、总蛋白含量、硫柳汞含量、氢氧化铝含量、效力测定、热稳定性试验、异常毒性检查、细菌内毒素检查等检定完全合格,主要用于预防婴幼儿轮状病毒感染性疾病。  
国际公布  
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