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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:一种建立转hCGβ基因的小鼠乳腺癌肿瘤模型的方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

一种建立转hCGβ基因的小鼠乳腺癌肿瘤模型的方法

公开(公告)号 CN1935266A  
公开(公告)日 2007.03.28  
申请(专利)号 CN200510086513.X  
申请日期 2005.09.23  
专利名称 一种建立转hCGβ基因的小乳腺癌肿瘤模型的方法  
主分类号 A61K49/00(2006.01)I  
分类号 A61K49/00(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 中国科学院动物研究所  
发明(设计)人 石树群;彭景楩  
地址 100080北京市海淀区北四环路25号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 北京泛华伟业知识产权代理有限公司  
代理人 高存秀  
国省代码 北京;11  
主权项 一种建立转hCGβ基因的小鼠乳腺癌肿瘤模型的方法,包括下述步骤: 1)制得全长基因hCGβ,该基因在基因文库编号为:hCGβ:NM000737; 2)回收纯化上述hCGβcDNA片段; 3)将步骤2)得到的hCGβcDNA片段重组到带有pEGFP标记的真核表达载体中,构建成pEGFP-hCGβ真核表达质粒; 4)将pEGFP-hCGβ真核表达质粒经脂质体转染小鼠乳腺癌细胞; 5)用流式细胞仪筛选荧光阳性pEGFP-hCGβ转基因小鼠乳腺癌细胞; 6)使用Western-Blotting验证步骤5)中荧光阳性pEGFP-hCGβ转基因小鼠乳腺癌细胞中hCGβ蛋白表达; 7)流式细胞仪三次富集筛选技术获得转hCGβ基因的小鼠乳腺癌细胞; 8)将步骤7)中测得的pEGFP-hCGβ转基因小鼠乳腺癌细胞注射到小鼠的乳腺位置,得到了转hCGβ基因的小鼠乳腺癌肿瘤模型。  
摘要 本发明涉及一种建立转人绒毛膜促性腺激素β亚单位(hCGβ)基因的小鼠乳腺癌肿瘤模型的方法,其为采用带有绿色荧光基因与hCGβ基因的共同表达真核表达载体pEGFP,结合流式细胞仪经过三次富集筛选技术,解决了现有技术提取单克隆很难获得转hCGβ基因细胞的难题,填补了没有建立分泌hCGβ肿瘤动物模型的空白,可以用于研究hCGβ与乳腺癌肿瘤发生,增殖,迁移和分化的机理,为在体评价CGβ抗肿瘤的效果提供小型动物模型。这对CGβ在防治hCGβ分泌型肿瘤的基础理论研究和临床前的应用研究具有重要意义。另外,其使用绿色荧光基因与hCGβ的共同表达,使在体直接观察肿瘤的生长,转移成为可能。  
国际公布  
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