公开(公告)号 | CN1935266A |
公开(公告)日 | 2007.03.28 |
申请(专利)号 | CN200510086513.X |
申请日期 | 2005.09.23 |
专利名称 | 一种建立转hCGβ基因的小鼠乳腺癌肿瘤模型的方法 |
主分类号 | A61K49/00(2006.01)I |
分类号 | A61K49/00(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 中国科学院动物研究所 |
发明(设计)人 | 石树群;彭景楩 |
地址 | 100080北京市海淀区北四环路25号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 北京泛华伟业知识产权代理有限公司 |
代理人 | 高存秀 |
国省代码 | 北京;11 |
主权项 | 一种建立转hCGβ基因的小鼠乳腺癌肿瘤模型的方法,包括下述步骤: 1)制得全长基因hCGβ,该基因在基因文库编号为:hCGβ:NM000737; 2)回收纯化上述hCGβcDNA片段; 3)将步骤2)得到的hCGβcDNA片段重组到带有pEGFP标记的真核表达载体中,构建成pEGFP-hCGβ真核表达质粒; 4)将pEGFP-hCGβ真核表达质粒经脂质体转染小鼠乳腺癌细胞; 5)用流式细胞仪筛选荧光阳性pEGFP-hCGβ转基因小鼠乳腺癌细胞; 6)使用Western-Blotting验证步骤5)中荧光阳性pEGFP-hCGβ转基因小鼠乳腺癌细胞中hCGβ蛋白表达; 7)流式细胞仪三次富集筛选技术获得转hCGβ基因的小鼠乳腺癌细胞; 8)将步骤7)中测得的pEGFP-hCGβ转基因小鼠乳腺癌细胞注射到小鼠的乳腺位置,得到了转hCGβ基因的小鼠乳腺癌肿瘤模型。 |
摘要 | 本发明涉及一种建立转人绒毛膜促性腺激素β亚单位(hCGβ)基因的小鼠乳腺癌肿瘤模型的方法,其为采用带有绿色荧光基因与hCGβ基因的共同表达真核表达载体pEGFP,结合流式细胞仪经过三次富集筛选技术,解决了现有技术提取单克隆很难获得转hCGβ基因细胞的难题,填补了没有建立分泌hCGβ肿瘤动物模型的空白,可以用于研究hCGβ与乳腺癌肿瘤发生,增殖,迁移和分化的机理,为在体评价CGβ抗肿瘤的效果提供小型动物模型。这对CGβ在防治hCGβ分泌型肿瘤的基础理论研究和临床前的应用研究具有重要意义。另外,其使用绿色荧光基因与hCGβ的共同表达,使在体直接观察肿瘤的生长,转移成为可能。 |
国际公布 |