公开(公告)号 | CN1935841A |
公开(公告)日 | 2007.03.28 |
申请(专利)号 | CN200610015578.X |
申请日期 | 2006.09.04 |
专利名称 | 抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY及其分离方法 |
主分类号 | C07K16/02(2006.01)I |
分类号 | C07K16/02(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 天津大学 |
发明(设计)人 | 孙淑清;马向辉 |
地址 | 300072天津市南开区卫津路92号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 |
代理人 | 陆 艺 |
国省代码 | 天津;12 |
主权项 | 一种抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY,其特征是用下述方法分离制成: (1)动物免疫用乙肝病毒表面抗原HbsAg作为免疫原,对产蛋鸡进行免疫,收集鸡蛋于4℃储存; (2)分离纯化分离出鸡卵黄,用6~9倍体积的去离子水稀释,用0.1MHCl调节pH为4.5~5.5,加入氯化钠至0.1~0.2M,4℃放置5~6小时,在3500转/分下离心分离20~25分钟,弃去沉淀,向上清液中加入硫酸钠至质量百分浓度为18~20%,进行第一次盐析,在3500转/分,离心分离出蛋白质沉淀,沉淀加去离子水至沉淀完全溶解为止,加入硫酸钠至质量百分浓度为14~16%,进行第二次盐析,离心分离,获得的蛋白质沉淀加去离子水至沉淀完全溶解为止,将此溶液用2.5×100cm Sephadex G-150凝胶柱过滤,过滤之前,凝胶柱用25mM pH=8的磷酸盐缓冲液预平衡,洗脱液流速200ml/小时,洗脱出的蛋白质流分用紫外光度计监测,吸收波长为280nm,收集第一条谱带,用聚乙二醇反透析浓缩,再透析除盐,得到一种抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY。 |
摘要 | 本发明公开了一种抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY及其分离方法,分离方法是:(1)动物免疫;(2)分离纯化分离出鸡卵黄,用去离子水稀释,调节pH,加氯化钠放5~6小时,离心分离,弃去沉淀,向上清液中加入硫酸钠进行第一次盐析,离心分离出蛋白质沉淀,沉淀加去离子水至沉淀完全溶解为止,加入硫酸钠进行第二次盐析,离心分离,获得的蛋白质沉淀加去离子水至沉淀完全溶解为止,用凝胶柱过滤,洗脱出的蛋白质流分用紫外光度计监测,吸收波长为280nm,收集第一条谱带,经反透析浓缩,再透析除盐,得到一种抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY,本发明的分离方法,工艺简单,成本低廉,所得样品质量较好。 |
国际公布 |