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抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY及其分离方法

公开(公告)号 CN1935841A  
公开(公告)日 2007.03.28  
申请(专利)号 CN200610015578.X  
申请日期 2006.09.04  
专利名称 抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY及其分离方法  
主分类号 C07K16/02(2006.01)I  
分类号 C07K16/02(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 天津大学  
发明(设计)人 孙淑清;马向辉  
地址 300072天津市南开区卫津路92号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 天津市北洋有限责任专利代理事务所  
代理人 陆 艺  
国省代码 天津;12  
主权项 一种抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY,其特征是用下述方法分离制成: (1)动物免疫用乙肝病毒表面抗原HbsAg作为免疫原,对产蛋鸡进行免疫,收集鸡蛋于4℃储存; (2)分离纯化分离出鸡卵黄,用6~9倍体积的去离子水稀释,用0.1MHCl调节pH为4.5~5.5,加入氯化钠至0.1~0.2M,4℃放置5~6小时,在3500转/分下离心分离20~25分钟,弃去沉淀,向上清液中加入硫酸钠至质量百分浓度为18~20%,进行第一次盐析,在3500转/分,离心分离出蛋白质沉淀,沉淀加去离子水至沉淀完全溶解为止,加入硫酸钠至质量百分浓度为14~16%,进行第二次盐析,离心分离,获得的蛋白质沉淀加去离子水至沉淀完全溶解为止,将此溶液用2.5×100cm Sephadex G-150凝胶柱过滤,过滤之前,凝胶柱用25mM pH=8的磷酸盐缓冲液预平衡,洗脱液流速200ml/小时,洗脱出的蛋白质流分用紫外光度计监测,吸收波长为280nm,收集第一条谱带,用聚乙二醇反透析浓缩,再透析除盐,得到一种抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY。  
摘要 本发明公开了一种抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY及其分离方法,分离方法是:(1)动物免疫;(2)分离纯化分离出鸡卵黄,用去离子水稀释,调节pH,加氯化钠放5~6小时,离心分离,弃去沉淀,向上清液中加入硫酸钠进行第一次盐析,离心分离出蛋白质沉淀,沉淀加去离子水至沉淀完全溶解为止,加入硫酸钠进行第二次盐析,离心分离,获得的蛋白质沉淀加去离子水至沉淀完全溶解为止,用凝胶柱过滤,洗脱出的蛋白质流分用紫外光度计监测,吸收波长为280nm,收集第一条谱带,经反透析浓缩,再透析除盐,得到一种抗乙肝病毒的鸡卵黄免疫球蛋白IgY,本发明的分离方法,工艺简单,成本低廉,所得样品质量较好。  
国际公布  
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