公开(公告)号 | CN1302101C |
公开(公告)日 | 2007.02.28 |
申请(专利)号 | CN200510050196.6 |
申请日期 | 2005.06.22 |
专利名称 | 一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法 |
主分类号 | C12N1/14(2006.01)I |
分类号 | C12N1/14(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 浙江大学 |
发明(设计)人 | 李永泉;郑 静 |
地址 | 310027浙江省杭州市玉古路20号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 杭州中成专利事务所有限公司 |
代理人 | 唐银益 |
国省代码 | 浙江;33 |
主权项 | 一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法,其特征在于,以人工分离培养到的大团囊虫草纯菌株(Cordycepsophioglossoides)为出发菌种,依次经固体斜面培养,摇床种子培养和发酵培养完成; 所述大团囊虫草纯菌株保藏号是CGMCC No.1146; 所述固体斜面培养的方法为:从保藏菌种接种到配制的斜面培养基上,温度20~30℃,培养200~240小时;其中每1000毫升斜面培养基中包括:马铃薯100~300克、蔗糖或葡萄糖10~30克和琼脂15~25克,培养基的pH值调为4.8~6.5; 所述摇床种子培养的方法为:菌种固体斜面培养200~240小时后,挑取菌丝体接种于装有液体种子培养基的摇瓶中,在20~30℃培养,转速150~200rpm,培养60~72小时;其中每1000毫升种子培养基中包括:蔗糖20~60克、酵母粉或酵母膏10~50克、蛋白胨10~50克、MgSO4·7H2O0.1~0.5克和KH2PO40.1~0.5克; 所述发酵培养采用液体深层通气发酵培养,其方法是:液体种子摇床培养60~72小时后接种至装有发酵培养基的发酵罐中,接种量5~15%(V/V)、保持罐温20~30℃、罐压0.4~0.8kg/cm,搅拌速率100~250rpm,通气量1∶0.3~1∶1.2,发酵时间85~110小时;其中每1000毫升发酵培养基中包括:蔗糖50~100克、酵母粉或酵母膏10~60克,蛋白水解液20~100毫升、MgSO4·7H2O 0.2~1克和KH2PO4 0.2~1克,培养基的pH值调为4.8~6.5。 |
摘要 | 本发明公开了一种液体深层发酵生产大团囊虫草菌体的方法,以大规模液体深层发酵培养大团囊虫草菌体(Cordyceps ophioglossoides)为目标。以人工分离培养到的大团囊虫草纯菌株为出发菌种,经斜面培养、摇瓶种子培养、最后到发酵罐培养,发酵液中的菌丝体以干重计可达2~3%的。本发明中公开的液体种子培养基和发酵培养基分别由蔗糖、酵母粉(膏)、蛋白胨、镁盐、钾盐和蔗糖、酵母粉(膏)、蛋白水解液、镁盐、钾盐组成。两种培养基分别适合液体种子阶段培养和深层液体通气培养大团囊虫草菌,合理满足了大团囊虫草菌不同发酵时期所需的营养物质,促进了菌体的生长和繁殖,提高了菌的活性。 |
国际公布 |