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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:鼻咽癌相关基因UBAP1编码蛋白的纯化及其抗体的制备专利检索:专利号/专利人/发明人
    

鼻咽癌相关基因UBAP1编码蛋白的纯化及其抗体的制备

公开(公告)号 CN1908004A  
公开(公告)日 2007.02.07  
申请(专利)号 CN200510031955.4  
申请日期 2005.08.01  
专利名称 鼻咽癌相关基因UBAP1编码蛋白的纯化及其抗体的制备  
主分类号 C07K1/14(2006.01)I  
分类号 C07K1/14(2006.01)I;C07K19/00(2006.01)I;C07K16/18(2006.01)I;C12P19/34(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 中南大学肿瘤研究所  
发明(设计)人 李桂源;肖炳燚;曾朝阳;范松青;熊 炜;李小玲;沈守荣;周 鸣;李伟芳  
地址 410078湖南省长沙市湘雅路110号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构  
代理人  
国省代码 湖南;43  
主权项 一种鼻咽癌相关基因UBAP1编码的蛋白的纯化,采用多聚酶链式反应方法克隆UBAP1基因蛋白编码序列,构建该基因的融合表达质粒,导入大肠杆菌JM109,IPTG诱导其在大肠杆菌中的表达,用GST融合蛋白纯化试剂盒纯化融合蛋白,本发明据原核表达载体pGEX-4T-2的GST阅读框架设计引物,使UBAP1基因的编码区阅读框与GST的阅读框架一致;其特征在于:以含UBAP1基因的质粒为模板(0.1μg),加入上述引物各10pmol进行扩增,回收PCR产物条带;用BamH I、Xhol I分别双酶切PCR回收产物及pGEX-4T-2载体,产生匹配的粘末端。小胶回收试剂回收线性的1.5kb的载体,UBAP1编码区片段。将pGEX-4T-2载体与UBAP1基因连接,构建成符合读框的GST-UBAP1融合基因。用含融合基因的pGEX-4T-2质粒转化大肠杆菌BL21,小量制备质粒DNA,BamH I和Xhol I酶切鉴定是否含插入片段,含插入片段的阳性克隆质粒DNA纯化后用DNA自动测序仪测序。  
摘要 一种鼻咽癌相关基因UBAP1编码蛋白的纯化及其抗体的制备,以获得用于鼻咽癌特异性诊断的UBAP1基因诊断试剂盒,属于蛋白质工程领域。本发明采用多聚酶链式反应(PCR)方法克隆UBAP1基因蛋白编码序列,构建该基因的融合表达质粒,导入BL21的大肠杆菌中,IPTG诱导其在大肠杆菌中的表达,采用谷胱甘肽亲和层析系统纯化融合蛋白,采用多点注射法制备多抗,骨髓瘤细胞融合法制备小来源性的抗UBAP1单抗,进而建立检测UBAP1表达水平的免疫组化法以特异地诊断鼻咽癌。  
国际公布  
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