| 公开(公告)号 | CN1297313C |
| 公开(公告)日 | 2007.01.31 |
| 申请(专利)号 | CN200410040720.7 |
| 申请日期 | 2004.09.16 |
| 专利名称 | 减毒株脊髓灰质炎灭活疫苗后处理方法 |
| 主分类号 | A61K39/13(2006.01)I |
| 分类号 | A61K39/13(2006.01)I;A61P31/14(2006.01)I;C12N7/04(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 中国医学科学院医学生物学研究所 |
| 发明(设计)人 | 褚嘉祐;姜述德;孙明波;廖国阳;张丽旌;李卫东;俞泳霆;李平忠 |
| 地址 | 650118云南省昆明市茭菱路379号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 昆明正原专利代理有限责任公司 |
| 代理人 | 徐玲菊 |
| 国省代码 | 云南;53 |
| 主权项 | 一种减毒株脊髓灰质炎灭活疫苗后处理方法，其特征在于采用下列工艺步骤： 1)、澄清：将大规模培养出来的病毒液经过1.0-0.6μm、0.6-0.45μm、0.45-0.22μm孔径的三级滤柱过滤、澄清，去除病毒液中的细胞碎片及杂质，并保持病毒液的无菌状态； 2)、浓缩：将澄清过的病毒液在Millipore交叉流超滤设备中，用10万截留分子量的超滤膜将病毒液浓缩200～400倍 3)、纯化： 凝胶过滤：在Phamacia Index70层析柱中，装Sepharose CL-6B层析填料，浓缩的病毒液用层析柱纯化，即用80mmol/L磷酸盐缓冲液洗脱，缓冲液pH7.0-7.2，紫外吸收波长280测吸收值，收集第一峰即为凝胶过滤纯化的病毒液； 离子交换：在Phamacia Index100层析柱中，装入DEAE SephasoreFast Flow层析填料，凝胶过滤纯化的病毒液用层析柱纯化，即用80mmol/L磷酸盐缓冲液洗脱，缓冲液pH7.0-7.2，紫外吸收波长280测吸收值，收集第一峰即为纯化的病毒液； 4)、除菌过滤：纯化的病毒液用0.22μm的滤膜除菌过滤，之后加入10倍浓缩M199，使病毒液中含有原倍的M199； 5)、灭活：在过滤的病毒液中，按终浓度为1/4000加入福尔马林灭活剂，在35-37℃温度下灭活12-14天，每天取样观察，灭活至第6天时，将病毒液用0.22μm滤膜过滤至另一无菌瓶中，继续灭活至12-14天，转入4℃保存，即为单价半成品。 |
| 摘要 | 本发明提供一种减毒株脊髓灰质炎灭活疫苗后处理方法，它将大规模培养出来的病毒液经过1.0-0.6μm、0.6-0.45μm、0.45-0.22μm孔径的三级滤柱过滤、澄清，超滤浓缩，柱层析纯化及灭活等后处理工艺，将病毒液制备成纯度高、免疫原性及安全好、质量稳定的合格疫苗半成品，从而满足减毒株脊髓灰质炎灭活疫苗的生产需要。本发明可大规模处理大量的病毒液，且生产工艺稳定，重复性好；用本发明生产的疫苗半成品，无外原因子污染，细胞DNA残留量少，灭活后的半成品经检查无活病毒存在，安全可靠，半成品抗原含量高，能够满足成品生产的需要；用本发明生产的疫苗半成品制备成Sabin IPV成品疫苗，其质量稳定，安全性及免疫原性良好，经检定全部符合国家生物制品规程的要求。 |
| 国际公布 |
