公开(公告)号
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CN1286980C
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公开(公告)日
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2006.11.29
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申请(专利)号
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CN200410061236.2
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申请日期
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2004.11.30
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专利名称
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表达人类反义受磷蛋白基因的重组腺相关病毒及其制备方法
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主分类号
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C12N15/861(2006.01)I
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分类号
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C12N15/861(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N7/01(2006.01)I;A61P9/04(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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华中科技大学同济医学院附属同济医院
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发明(设计)人
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汪道文;肖 啸;赵春霞;汪培华
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地址
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430030湖北省武汉市解放大道1095号转同济医院内科汪道文
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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武汉开元专利代理有限责任公司
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代理人
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王和平
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国省代码
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湖北;42
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主权项
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一种表达人类反义受磷蛋白基因的重组腺相关病毒,该重组腺相关病毒由天然状态的腺相关病毒和腺病毒经分子生物学方法人工剪切、修饰和加工而成,该载体系统包括包装质粒pXX2,辅助质粒pXX6,真核表达载体pXXUF1,并在真核表达载体pXXUF1内反向插入了人类受磷蛋白基因编码序列,其步骤: 1)包装质粒pXX2:它含有编码腺相关病毒Rep蛋白和Cap蛋白的 编码序列,并在上游和下游各插入一个p5启动子; 2)辅助质粒pXX6:其删除了腺病毒的致病基因序列,保留了腺病 毒E1A、E2A和VA1RNA基因; 3)真核表达载体pXXUF1:所用的是CMV启动子,其含有Not 1 多克隆位点,可以连接不同的目的基因,pXXUF1反向连接人受 磷蛋白基因,该载体含有rAAV转基因表达所必须的末端ITRs 重复序列。
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摘要
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本发明涉及一种表达人类反义受磷蛋白基因的重组腺相关病毒及其制备方法,属于生物工程技术领域,用于心力衰竭及其他相关疾病的基因治疗。该重组腺相关病毒由天然状态的腺相关病毒和腺病毒经分子生物学方法人工剪切、修饰和加工而成,该载体系统包括包装质粒pXX2,辅助质粒pXX6,真核表达载体pXXUF1和pXXUF3,并在真核表达载体pXXUF1内反向插入了人类受磷蛋白基因编码序列。本发明的表达人类反义受磷蛋白基因的重组腺相关病毒制备方法成功,所制备的重组腺相关病毒滴度高,能驱动目的基因长期有效的表达,可以用于心梗及其他相关性疾病所致心力衰竭的治疗。
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国际公布
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