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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法

公开(公告)号 CN1888078A  
公开(公告)日 2007.01.03  
申请(专利)号 CN200510120597.4  
申请日期 2005.12.31  
专利名称 细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法  
主分类号 C12Q1/18(2006.01)I  
分类号 C12Q1/18(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 武汉生物制品研究所  
发明(设计)人 方志正;刘汉平  
地址 430060湖北省武汉市武昌区临江大道7号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 武汉开元专利代理有限责任公司  
代理人 樊 戎  
国省代码 湖北;42  
主权项 一种细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法,其特征是:它是基于HepG2细胞内乙肝病毒基因组瞬时表达细胞模型,以HBVfxRNA、trxRNA和HBcAg为药效评价指标,以相应的引物和竞争子对实验组和对照组HBV fxRNA、HBV trxRNA定量分析,以ECL技术分析HBcAg并以它们为药效评价指标来筛选抗乙肝病毒药物,其具体步骤如下: (1)乙肝病毒全基因和CN基因以磷酸钙共转染HepG2细胞,并设加药物共同转染的实验组和不加药物转染的对照组; (2)转染后培养细胞4天,收获细胞,提取细胞内总RNA和蛋白质; (3)将总RNA逆转录为cDNA,与相应的竞争子作竞争聚合酶链反应,从而对实验组和对照组的HBV fxRNA、HBV trxRNA进行定量分析; (4)将实验组和对照组的蛋白质以ECL技术对HBcAg进行分析,通过HBV fxRNA、HBV trxRNA和HBcAg的检测结果筛选抗乙肝病毒药物。  
摘要 本发明涉及一种乙型肝炎病毒药物的筛选方法,具体地说是一种细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法。它是基于HepG2细胞内乙肝病毒基因组瞬时表达细胞模型或稳定表达的细胞系HepG2 2.2.15细胞,以HBV fxRNA、trxRNA和HBcAg为药效评价指标,以相应的引物和竞争子对实验组和对照组HBV fxRNA、HBV trxRNA定量分析,以ECL技术分析HBcAg并以它们为药效评价指标来筛选抗乙肝病毒药物。本发明对HBV生命周期的前期阶段RNA的复制有抑制作用,能够有效的抑制HBV复制。采用本发明方法可以比较简便、有效和经济地大量初筛抗乙肝病毒(HBV)药物。  
国际公布  
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