公开(公告)号
|
CN1888078A
|
公开(公告)日
|
2007.01.03
|
申请(专利)号
|
CN200510120597.4
|
申请日期
|
2005.12.31
|
专利名称
|
细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法
|
主分类号
|
C12Q1/18(2006.01)I
|
分类号
|
C12Q1/18(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I
|
分案原申请号
|
|
优先权
|
|
申请(专利权)人
|
武汉生物制品研究所
|
发明(设计)人
|
方志正;刘汉平
|
地址
|
430060湖北省武汉市武昌区临江大道7号
|
颁证日
|
|
国际申请
|
|
进入国家日期
|
|
专利代理机构
|
武汉开元专利代理有限责任公司
|
代理人
|
樊 戎
|
国省代码
|
湖北;42
|
主权项
|
一种细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法,其特征是:它是基于HepG2细胞内乙肝病毒基因组瞬时表达细胞模型,以HBVfxRNA、trxRNA和HBcAg为药效评价指标,以相应的引物和竞争子对实验组和对照组HBV fxRNA、HBV trxRNA定量分析,以ECL技术分析HBcAg并以它们为药效评价指标来筛选抗乙肝病毒药物,其具体步骤如下: (1)乙肝病毒全基因和CN基因以磷酸钙共转染HepG2细胞,并设加药物共同转染的实验组和不加药物转染的对照组; (2)转染后培养细胞4天,收获细胞,提取细胞内总RNA和蛋白质; (3)将总RNA逆转录为cDNA,与相应的竞争子作竞争聚合酶链反应,从而对实验组和对照组的HBV fxRNA、HBV trxRNA进行定量分析; (4)将实验组和对照组的蛋白质以ECL技术对HBcAg进行分析,通过HBV fxRNA、HBV trxRNA和HBcAg的检测结果筛选抗乙肝病毒药物。
|
摘要
|
本发明涉及一种乙型肝炎病毒药物的筛选方法,具体地说是一种细胞内筛选抗乙型肝炎病毒药物的方法。它是基于HepG2细胞内乙肝病毒基因组瞬时表达细胞模型或稳定表达的细胞系HepG2 2.2.15细胞,以HBV fxRNA、trxRNA和HBcAg为药效评价指标,以相应的引物和竞争子对实验组和对照组HBV fxRNA、HBV trxRNA定量分析,以ECL技术分析HBcAg并以它们为药效评价指标来筛选抗乙肝病毒药物。本发明对HBV生命周期的前期阶段RNA的复制有抑制作用,能够有效的抑制HBV复制。采用本发明方法可以比较简便、有效和经济地大量初筛抗乙肝病毒(HBV)药物。
|
国际公布
|
|