公开(公告)号
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CN1876176A
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公开(公告)日
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2006.12.13
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申请(专利)号
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CN200610052400.2
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申请日期
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2006.07.11
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专利名称
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ω-芋螺毒素M VII A突变体及制备和应用
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主分类号
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A61K38/17(2006.01)I
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分类号
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A61K38/17(2006.01)I;A61P29/00(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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浙江大学
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发明(设计)人
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詹金彪;夏 铮;王 峰;徐小蓉;黄建松
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地址
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310027浙江省杭州市西湖区浙大路38号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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杭州求是专利事务所有限公司
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代理人
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张法高;赵杭丽
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国省代码
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浙江;33
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主权项
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一种ω-芋螺毒素M VII A突变体,具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列: Gly-Ser-Cys-Lys-Gly-Lys-Gly-Ala-Lys-Cys-Ser-Arg-Leu-Met-Tyr-Asp-Cys-Cys-Thr-Gly-Ser-Cys-Arg-Ser-Gly-Lys-Cys 27,该多肽有机化合物分子中Cys3与Cys18、Cys10与Cys22、Cys17与Cys27之间分别形成三对二硫键,C-端为非酰胺化Cys。
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摘要
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本发明提供一种重组ω-芋螺毒素M VII A(CTX M VIIA)突变体,具有SEQ ID NO:1的氨基酸序列,采用与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合表达的方法,在已构建的pGEX-2T/CTX M VIIA原核表达质粒基础上,在大肠杆菌中用IPTG诱导表达GST-CTX M VIIA融合蛋白,经GST亲和层析的方法纯化融合蛋白,用凝血酶进行酶切产生CTX M VIIA的突变体,产物经过凝胶柱进行分离纯化;为获得正确的二硫键配对,先用还原剂将突变体的二硫键配打开,再用PBS透析过夜,空气氧化获得目的产物。本发明方法,操作简单、质量稳定、成本较低,可在制备无成瘾型的镇痛药物中应用。
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国际公布
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