公开(公告)号
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CN1287862C
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公开(公告)日
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2006.12.06
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申请(专利)号
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CN200410073125.3
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申请日期
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2004.09.29
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专利名称
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MG7-Ag模拟表位构建胃癌特异性多表位基因疫苗的方法
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主分类号
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A61K48/00(2006.01)I
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分类号
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A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国人民解放军第四军医大学
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发明(设计)人
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吴开春;陈 瑜;宁小萱;丁 杰;樊代明
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地址
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710032陕西省西安市长乐西路17号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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西安通大专利代理有限责任公司
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代理人
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李郑建
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国省代码
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陕西;61
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主权项
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一种MG7-Ag模拟表位构建胃癌特异性多表位基因疫苗的方法,其特征在于,采用单一表位以同源串联形式,以HSP70为载体,GGGS为间隔序列,连续四次PCR,并以前一次PCR的产物作为下一次PCR的模版,将四个不同的模拟表位以及间隔序列连接起来;构建含有4个串联不同的MG7-Ag模拟表位与HSP70的融合基因疫苗,其串联表位的具体核苷酸以及氨基酸序列如下: K P H V H T K G G G S AAA CCA CAT CTA CAT ACA AAA GGA GGA GGA AGT K P H L H F H G G G S AAA CCA CAT CTT CAT TTT CAT GGA GGA GGA AGT K P H S H L H G G G S AAA CCA CAT AGT CAT CTT CAT GGA GGA GGA AGT S W A P V Y A R A N AGT TGG GCT CCA GTT TAT GCT AGA GCT AAT。
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摘要
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本发明公开了以胃癌MG7-Ag模拟表位为基础构建的多表位DNA疫苗及其方法。本发明利用HSP70为载体,GGGS为间隔序列,构建含有4个串联不同的MG7-Ag模拟表位与HSP70的融合基因疫苗。经Western blotting鉴定表明融合基因在小鼠骨髓瘤SP2/0细胞中成功表达,并保持了亲本蛋白各自的活性。质粒免疫接种后,融合基因疫苗可诱导小鼠产生抗MG7-Ag特异性抗体以及一定数量的特异性CTL分泌IFNγ,多表位疫苗免疫组优于单表位疫苗组和其他对照组。肿瘤攻击后,疫苗免疫组小鼠成瘤体积明显小于对照组。这一基因疫苗在胃癌的免疫治疗研究,胃癌特异性疫苗的研制方面将具有巨大的潜在价值。
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国际公布
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