公开(公告)号
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CN1282750C
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公开(公告)日
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2006.11.01
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申请(专利)号
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CN200510060040.6
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申请日期
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2005.03.25
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专利名称
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WSSV的FQ-PCR诊断试剂盒及检测方法
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主分类号
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C12Q1/68(2006.01)I
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分类号
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C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/25(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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舟山市疾病预防控制中心;杭州博康生物科技有限公司
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发明(设计)人
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王忠发;邵俊斌;王建跃;沃健儿;何伟贤;薛 忆
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地址
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316000浙江省舟山市定海区解放西路231号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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舟山固浚专利事务所
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代理人
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范荣新
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国省代码
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浙江;33
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主权项
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一种WSSV的FQ-PCR诊断试剂盒,有试剂容器,其特征是其中有包装下列试剂的试剂容器: TaqMan Buffer液; 特异性引物-1; 特异性引物-2; 特异性TaqMan探针; 其中, 特异性引物-1的序列为:5’-CCA GAG ATG GGA GTAACA CGT-3’; 特异性引物-2的序列为:5’-CTC CTC TGTTGC GAATAC TTC TAAAT-3’; 特异性TaqMan探针的序列为:5’-FAM-CGG ACC TTG TGC AAC TCT CCA CCTCC-TAMARA-3’。
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摘要
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已用于WSSV诊断的FQ-PCRe有耗时较长,存在非特异扩增产物或引物二聚体导致的假阳性结果缺陷。TaqMan PCR有更高的灵敏性和高精确性,但尚未应用于WSSV的诊断。本发明提供的WSSV的FQ-PCR诊断试剂盒和方法,试剂盒中所装的即检测方法中所用反应体系中有2×TaqMan Buffer液、特异性引物-1、特异性引物-2、TaqMan探针等等;PCR仪中的DNA操作过程是先作93℃下预变性2分钟;再作93℃下变性5秒钟、60℃下退火延伸30秒钟、60℃下单点荧光检测的循环40次。本发明提供的WSSV的FQ-PCR诊断试剂盒和方法,配备了所有无法从市场上购得所需的各种试剂;达到了高灵敏度、高重复性、高特异性的指标,另外还有所需待测样本数量要求低和检测所需时间短的特点。
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国际公布
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