公开(公告)号
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CN1856570A
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公开(公告)日
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2006.11.01
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申请(专利)号
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CN03827070.6
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申请日期
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2003.07.29
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专利名称
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使用经过加工的临床样品通过涂片显微镜检术、培养和聚合酶链式反应诊断结核的方法及其试剂盒
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主分类号
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C12N15/10(2006.01)I
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分类号
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C12N15/10(2006.01)I;G01N33/483(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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全印度医学科学院
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发明(设计)人
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J·S·蒂亚吉;S·查克拉瓦蒂
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地址
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印度新德里
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颁证日
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国际申请
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2003-07-29 PCT/IB2003/003211
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进入国家日期
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2006.03.14
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专利代理机构
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中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
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代理人
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赵艳华
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国省代码
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印度;IN
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主权项
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一种有效且经济的加工可用于简单、快速、安全、灵敏且准确地诊断细菌感染的临床样品的方法,该方法使用包含由通用样品加工(USP)溶液(由浓度3至6M的盐酸胍(GuHCl)、浓度40-60mM且pH 7.3-7.7的Tris-Cl、浓度20-30mM的EDTA、浓度0.3-0.8%的十二烷基肌氨酸钠、浓度0.1-0.3M的β-巯基乙醇组成)组成的溶液1、由浓度65-70mM且pH6.7-6.8的磷酸钠组成的溶液2(可选择地,可以由无菌水替代)、和由浓度0.03-0.08%的Tween 80组成的溶液3、及用于分离DNA的包含浓度8-12%的Chelex 100悬浮液的溶液A、由浓度0.02-0.04%的Triton X-100组成的溶液B和包含浓度0.2-0.4%的Tween 20的溶液C(任选地,可以使用单独溶液3或具有0.03-0.1%Triton X 100的溶液3代替溶液A、B和C从含高杆菌载量或低废料的样品分离DNA)的组合物,所述方法包括步骤: a.获得临床样品, b.将1.5至2体积的溶液1与样品混合, c.匀浆混合物并避免起泡, d.向匀浆物添加溶液2或无菌水,之后离心获得沉淀, e.任选地取决于沉淀体积的减少,用溶液1洗涤沉淀, f.用水洗涤经溶液1洗涤的沉淀,和 g.将水洗涤后的沉淀重悬在溶液3中,以得到用于诊断的经加工样品。
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摘要
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本发明涉及加工临床样品以便通过涂片显微镜检术、培养或PCR诊断细菌性感染的方法和用于实施该方法的试剂盒。本发明还涉及两组对结核分枝杆菌的DevR基因具有特异性的引物以及使用所述引物通过PCR筛选结核病患者的方法。
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国际公布
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2005-02-03 WO2005/010186 英
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