公开(公告)号
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CN1843510A
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公开(公告)日
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2006.10.11
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申请(专利)号
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CN200510016689.8
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申请日期
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2005.04.06
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专利名称
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毛形属线虫疫苗的制备方法及医用用途
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主分类号
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A61K48/00(2006.01)I
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分类号
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A61K48/00(2006.01)I;A61K39/00(2006.01)I;A61P37/04(2006.01)I;A61P33/14(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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张西臣
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发明(设计)人
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张西臣;李建华;王静敏;宫鹏涛
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地址
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130062吉林省长春市西安大路175号军需大学
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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吉林长春新纪元专利代理有限责任公司
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代理人
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陈宏伟
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国省代码
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吉林;22
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主权项
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毛形属线虫疫苗的制备方法,包括以下步骤: 首先获得纯净的毛形属线虫,然后提取RNA,分离纯化mRNA,合成cDNA第一条链及cDNA第二条链,将cDNA与ECORI适配子连接并对连接产物磷酸化,后分离cDNA片段,并与λZAP载体连接,进行噬菌体包装,测定所构建cDNA文库滴度及重组率后进行文库扩增,提取λ噬菌体DNA,并进行cDNA文库插入片段检测,获得毛形属线虫cDNA文库;利用抗体或探针筛选功能性抗原基因,将筛选的功能性基因与真核基因表达载体连接,构建重组质粒,获得毛形属线虫核酸疫苗。
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摘要
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本发明提供一种毛形属线虫疫苗,包括其核酸疫苗及基因工程苗的制备方法:将毛形属线虫RNA提取,分离纯化,合成cDNA第一条链及第二条链,将cDNA与ECORI适配子连接并对连接产物磷酸化,后分离cDNA片段,并与λZAP载体连接,进行噬菌体包装,提取λ噬菌体DNA,并进行cDNA文库插入片段检测,获得毛形属线虫cDNA表达文库。将筛选的功能性基因与真核基因表达载体连接,构建重组质粒,制备毛形属线虫核酸疫苗:将功能性抗原基因与原核表达载体连接,转化DH5α菌,转化大肠杆菌,进行高效表达,获得毛形属线虫基因工程疫苗。本发明产品可用于肿瘤疾病,性功能低下等免疫功能低下或缺陷引起疾病的预防和治疗。
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国际公布
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