公开(公告)号
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CN1844392A
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公开(公告)日
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2006.10.11
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申请(专利)号
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CN200610076719.9
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申请日期
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2006.04.18
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专利名称
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重组人睫状神经营养因子突变体及其制备方法
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主分类号
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C12N15/12(2006.01)I
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分类号
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C12N15/12(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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2005.4.21 CN 200510066193.1
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申请(专利权)人
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梁亮胜
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发明(设计)人
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朱俊铭;余永恒;雷继军;吴海祥;张晓林;张光勋;文 力
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地址
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430019湖北省武汉市江岸区黄浦大街丝宝国际大厦
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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北京集佳知识产权代理有限公司
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代理人
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顾晋伟;刘继富
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国省代码
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湖北;42
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主权项
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一种制备rhCNTF突变体的方法,包括下列步骤: (a)将rhCNTF突变体基因序列克隆入表达载体以得到重组载体,并导入大肠杆菌中,生成含有重组载体的基因工程菌; (b)培养基因工程菌至A600=12~14时,加入乳糖,诱导rhCNTF突变体在基因工程菌中可溶性表达; (c)诱导后,向培养液中缓慢加入葡萄糖作为主要碳源,并控制培养液中溶解氧值为10~15%,继续培养; (d)待基因工程菌的A600=20~30时,收获菌体,并将菌体破碎得到破菌液; (e)纯化破菌液,得到纯化产品。
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摘要
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本发明涉及重组蛋白与其制备方法,具体涉及重组人睫状神经营养因子(简称rhCNTF)突变体及其制备方法,更具体的说,本发明涉及用乳糖诱导rhCNTF突变体在大肠杆菌BL21(DE3)中高效可溶表达、并从中加以分离纯化的方法,以及通过该方法制备的rhCNTF突变体。
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国际公布
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