| 公开(公告)号 | CN1276093C |
| 公开(公告)日 | 2006.09.20 |
| 申请(专利)号 | CN01114690.7 |
| 申请日期 | 2001.05.15 |
| 专利名称 | 一种检测丙肝病毒RdRp酶的方法，和载体以及用其转化的细胞株及应用 |
| 主分类号 | C12Q1/25(2006.01)I |
| 分类号 | C12Q1/25(2006.01)I;C12Q1/70(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 李卫云 |
| 发明(设计)人 | 李卫云 |
| 地址 | 510623广东省广州市珠江新城南天广场皇朝阁1005，1001 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | |
| 代理人 | |
| 国省代码 | 广东;44 |
| 主权项 | 一种检测丙肝病毒RdRp酶的方法，该方法包括下列步骤： a.制备含指示的重组载体，该载体含有在T3或T7或SP6噬菌体启动子控制下的全长丙肝病毒基因组DNA序列，且在丙肝病毒基因组序列的NS5B编码区反方向插入受EMCV的IRES控制的GFP基因序列； b.将步骤a制备的重组载体转染已转染正链RNAT7RNA多聚酶基因的细胞株或能表达正链RNAT7RNA多聚酶的细胞株； c.筛选GFP和正链RNAT7RNA多聚酶双阳性细胞为转化细胞株； d.在转化细胞株中加入待检物； e.检测GFP是否表达。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种在细胞中检测丙肝病毒RdRp酶的方法，和检测丙肝病毒RdRp酶所构建的载体，以及用载体转化的细胞株及其应用。该方法包括制备含指示的重组载体并转染含T7噬菌体RNA多聚酶基因质粒的细胞株，通过将检测物加入已转染的细胞株来检测丙肝病毒RdRp。该方法可以快速筛选丙肝病毒RdRp的抑制剂，以便开发抗丙肝病毒的药物。使用这种方法也可以检测丙肝病毒RdRp突变体，该突变体可能有助于开发丙肝病毒疫苗。另外，这种检测方法可以用来监控细胞中丙肝病毒的感染和复制。它也是一种体外测定丙肝病毒感染滴度的简单方法。 |
| 国际公布 |
