| 公开(公告)号 | CN1273486C |
| 公开(公告)日 | 2006.09.06 |
| 申请(专利)号 | CN200410021844.0 |
| 申请日期 | 2004.02.17 |
| 专利名称 | 肿瘤特异性抗原TA48及其在癌症诊断中的应用 |
| 主分类号 | C07K14/435(2006.01)I |
| 分类号 | C07K14/435(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;G01N33/574(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 叶尚勉;叶尚蓉 |
| 发明(设计)人 | 叶尚勉;叶尚蓉 |
| 地址 | 610016四川省成都市梓橦街42号3单元7号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 成都虹桥专利事务所 |
| 代理人 | 李高峡 |
| 国省代码 | 四川;51 |
| 主权项 | 一种肿瘤特异性抗原，其特征在于它由以下方法制备： a)将癌细胞系或肿瘤组织进行细胞裂解并匀浆，离心取上清液；所述癌细胞系为乳腺癌细胞株MCF-7；所述细胞裂解和匀浆在0.5％NP40，0.15MNaCl，5mMEDTA，50mMTris，1mMPMSF溶液中进行，12000rpm离心30分钟； b)将获得的上清液经离子交换层析柱分离，梯度洗脱并分步收集洗脱的蛋白部分；所述离子交换层析柱的离子交换试剂为阳离子琼脂糖SEPHAROSE，层析柱大小为2.5×11cm，所述离子交换试剂体积2毫升；用20ml0.05MPBSPH＝7离子交换缓冲液进行柱平衡；再将细胞裂解上清液或组织匀浆上清液上柱后，室温下用离子交换缓冲液梯度洗脱，洗脱液用分步收集仪收集，每步洗脱液的容积为所述离子交换试剂的10倍，所有的操作均在室温下进行；所述每步梯度洗脱液组成为： 1).0.005MPBS(pH＝7) 2).0.028M磷酸二氢钠溶液 3).0.05M磷酸二氢钠溶液 4).0.175M磷酸二氢钠溶液 5).0.3M磷酸二氢钠溶液 6).1.0M磷酸二氢钠溶液 7).1.0M磷酸溶液 在分步收集中每1ml分部收集洗脱液； c)将分步收集的每一分部的洗脱液与癌症病人的血清进行酶联免疫反应，确定反应呈阳性的分部，存在于第7步洗脱液的69至71段收集液； d)将c)步骤中获得的收集液进行进一步纯化和鉴定，获得肿瘤特异性抗原。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种新的肿瘤特异性抗原TA48，采用液相层析分离法结合癌症血清学的抗体捕获酶联免疫测定方法，从癌细胞系和肿瘤组织中分离获得。该抗原在所有常见的癌细胞株均有表达，而在相应的正常组织则不表达或表达低下。本发明还提供一种体外早期诊断癌症的方法。通过测定样本中抗肿瘤特异性抗原TA48的自身抗体的量，而判断肿瘤的发生、发展和预后情况。该检测方法有95％的特异性，平均67.6％的敏感性，能够用于各种不同类型癌症的普查。可早期检测到在肿瘤的发生，并可对肿瘤的发展情况和预后作出评估。具有临床应用的良好前景。 |
| 国际公布 |
