公开(公告)号
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CN1824327A
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公开(公告)日
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2006.08.30
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申请(专利)号
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CN200510134964.6
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申请日期
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2005.12.27
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专利名称
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一种用鸡MHC恒定链基因片段引导的核酸疫苗制备方法
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主分类号
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A61K48/00(2006.01)I
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分类号
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A61K48/00(2006.01)I;A61P37/04(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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安徽农业大学
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发明(设计)人
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余为一;仲大莲;李槿年
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地址
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230036安徽省合肥市长江西路130号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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合肥诚兴知识产权代理有限公司
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代理人
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宣圣义
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国省代码
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安徽;34
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主权项
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一种用鸡MHC恒定链基因片段引导的核酸疫苗制备方法,其特征在于: (1)用含连接真核表达质粒酶切位点和鸡MHC恒定链基因片段起始区核苷酸序列的一对引物,经PCR从鸡脾细胞mRNA克隆鸡恒定链基因片段5’端1至83核苷酸序列,作为引导片段,并经过DNA序列测定鉴定: (2)用含鸡MHC恒定链基因片段终止区、特定病原体保护性抗原或抗原表位基因片段起始区及终止区及真核表达质粒的酶切位点核苷酸序列的引物,经过PCR从病原体mRNA克隆并获得抗原或抗原表位基因片段; (3)用含连接真核表达质粒酶切位点和抗原表位基因片段起始区核苷酸序列和病原保护性抗原或抗原表位基因片段终止区、真核表达质粒的酶切位点核苷酸序列的引物,经过PCR从已制备的鸡MHC恒定链基因片段和特定病原体抗原或抗原表位基因片段获得融合基因片段; (4)应用限制性内切酶使鸡MHCII恒定链基因片段的-5′端与保护性抗原融合基因片段的的-3′端成粘性末端,经连接酶作用定向插入真核表达载体。
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摘要
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一种用鸡MHC恒定链基因片段引导的核酸疫苗制备方法属疫苗制备技术领域。其所要解决的技术问题是:通过制备含编码鸡MHC恒定链和特定病原体保护性抗原表位核苷酸序列的核酸疫苗,提供一种既安全、又高效的新型疫苗型。其技术要点是:先制备鸡MHC定链基因片段,再制备特定病原体保护性抗原或抗原表位基因片段;再制备含鸡MHC恒定链与特定病原体保护性抗原或抗原表位的融合基因片段;最后将鸡MHC恒定链与特定病原体保护性抗原融合基因片段定向插入真核表达载体,即得到本发明的核酸疫苗。与现有的疫苗相比较,本发明的核酸疫苗由于不存在病原返祖和变异的可能,所以安全可靠;且可提高免疫应答效果。
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国际公布
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