| 公开(公告)号 | CN1821423A |
| 公开(公告)日 | 2006.08.23 |
| 申请(专利)号 | CN200510028953.X |
| 申请日期 | 2005.08.19 |
| 专利名称 | 一种抗关节炎药物细胞靶标筛选系统及筛药的方法 |
| 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分类号 | C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 上海凯曼生物科技有限公司 |
| 发明(设计)人 | 龚邦强;郭 雷;连霁虹;纪 伟 |
| 地址 | 200233上海市漕河泾高科技开发区田林路219号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海开祺知识产权代理有限公司 |
| 代理人 | 费开逵;谢文凯 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种抗关节炎药物的细胞靶标筛选系统由如下步骤组成： a)将mPGES-1promoter、COX-1promoter和COX-2promoter的部分基因克隆进pGL3BN载体Luciferase基因上游的克隆位点XhoI/HindIII、NheI/XhoI、XhoI/BglII之间重组载体pGL3BN/mPGES-1promoter、pGL3BN/COX-1promoter、pGL3BN/COX-2promoter； b)将构建好的重组质粒pGL3BN/mPGES-1promoter、pGL3BN/COX-1promoter、pGL3BN/COX-2promoter利用脂质体转染法分别转染人A549细胞株； c)利用有限稀释法筛选得到基因水平上稳定表达的筛药细胞靶标M1、M2和M3； d)mPGES-1promoter的表达启动其下游Luciferase的表达。以Luciferase表达水平反映mPGES-1promoter表达程度。同理适用COX-1promoter及COX-2promoter组成共同的靶标筛选系统。 |
| 摘要 | 本发明建立了一种抗关节炎药物的细胞靶标筛选系统及筛药的方法。本发明建立的细胞靶标筛药系统是运用分子克隆技术，分别将mPGES-1 promoter、COX-1 promoter和COX-2promoter部分基因克隆进人细胞株，获得在基因水平上表达的筛药细胞靶标M1、M2和M3，进而共同组成细胞靶标筛药系统。通过测定被筛选化合物抑制M1、M2和M3细胞luciferase表达的程度来筛选抗关节炎药物。 |
| 国际公布 |
