公开(公告)号
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CN1810959A
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公开(公告)日
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2006.08.02
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申请(专利)号
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CN200610033007.9
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申请日期
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2006.01.13
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专利名称
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人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法及医用组合物
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主分类号
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C12N5/08(2006.01)I
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分类号
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C12N5/08(2006.01)I;A61K35/50(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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深圳市北科生物科技有限公司
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发明(设计)人
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胡 祥;杨 波
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地址
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518057广东省深圳市南山区科技园深港产学研基地大楼西座W400座
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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深圳市中知专利商标代理有限公司
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代理人
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宋湘红
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国省代码
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广东;44
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主权项
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一种人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法,其特征在于包括如下顺序的步骤: (1)取人羊膜先用胰蛋白酶消化,然后用胶原酶、脱氧核糖核酸酶消化,得到细胞悬液; (2)将上一步所得的细胞悬液过滤,制成单细胞悬液; (3)将第(2)步所得细胞接种于培养基中,置于37℃、饱和湿度、体积分数为5%的CO2培养箱中进行培养,并通过换液和传代,使人羊膜间充质干细胞逐渐得到扩增和纯化,所述培养基采用VDMEM∶VF12=1∶1的DMEM/F12培养基,其中含有体积百分含量为10%-20%的胎牛血清和终浓度为10-20ng/ml的碱性成纤维生长因子。
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摘要
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本发明为一种人羊膜间充质干细胞的分离及培养方法及医用组合物,分离及培养方法是将人羊膜用胰蛋白酶、胶原酶、脱氧核糖核酸酶相继消化,然后过滤制成单细胞悬液,再采用加有体积百分含量为10%-20%的胎牛血清和终浓度为10-20ng/ml的碱性成纤维生长因子的VDMEM∶VF12=1∶1的DMEM/F12培养基,置于37℃、饱和湿度、体积分数为5%的CO2培养箱中进行培养,通过换液和传代,使人羊膜间充质干细胞逐渐得到扩增和纯化。本发明方法具有来源广泛,不受伦理限制等优越性,具有广阔的应用前景,本发明的医用组合物可用于神经替代治疗、用于心肌梗塞的治疗、用于糖尿病的治疗、用于骨组织工程、应用于整形外科等。
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国际公布
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