| 公开(公告)号 | CN1263771C |
| 公开(公告)日 | 2006.07.12 |
| 申请(专利)号 | CN03129304.2 |
| 申请日期 | 2003.06.16 |
| 专利名称 | 骨保护素融合蛋白的制备方法和用途 |
| 主分类号 | C07K19/00(2006.01)I |
| 分类号 | C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I;A61P19/10(2006.01)I;A61P19/08(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 上海富纯中南生物技术有限公司 |
| 发明(设计)人 | 倪 健;杨武剑;罗 鹏;杨子义;迟志永 |
| 地址 | 201702上海市徐泾镇华徐公路422号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 上海专利商标事务所有限公司 |
| 代理人 | 徐 迅 |
| 国省代码 | 上海;31 |
| 主权项 | 一种产生OPG融合蛋白的方法，其特征在于，该方法包括： (a)将编码OPG、其变体或片段的核苷酸序列和编码Fc蛋白、其变体或片段的核苷酸序列可操作地连于表达载体，得到OPG融合蛋白重组表达载体； (b)将步骤(a)中的重组表达载体转入甲醇酵母，筛选获得表达OPG融合蛋白的工程菌； (c)在合适的条件下发酵培养步骤(b)获得的工程菌； (d)从步骤(c)中的发酵培养产物中纯化分离所述融合蛋白；其中，所述融合蛋白的形式为R1-L-R2和R1-R2，其中R1为OPG蛋白、或其变体或片段，R2为Fc蛋白、或其变体或片段，L为接头； 其中，所述OPG蛋白、或其变体、片段选自： (1)SEQIDNO：1所示的OPG蛋白序列； (2)氨基酸序列22-X，其中X为SEQIDNO：1所示的包括位置185-401的任何残基； (3)在(2)所述的氨基酸序列前加上Ile-Asp两个氨基酸； (4)在(2)所述的氨基酸序列前加上Met； 所述Fc蛋白、或其变体或片段选自： (A)SEQIDNO：2所示的氨基酸序列； (B)亚部分(A)的氨基酸序列，在以下一个或多个位置具有取代或缺失的不同氨基酸，其中的编号采用SEQIDNO：2的序列编号： i.一个或多个半胱氨酸残基； ii.一个或多个酪氨酸残基； iii.缺失或用丙氨酸取代位置5的半胱氨酸； iv.缺失或用谷氨酰胺取代位置20的谷氨酸； v.缺失或用丙氨酸取代位置130的谷氨酸； vi.缺失或用丙氨酸取代位置105的赖氨酸； vii.缺失或取代位置107的赖氨酸； viii.缺失N端1-17位的氨基酸序列； ix.取代或缺失一个或多个残基以消除Fc受体结合位点； x.取代或缺失一个或多个残基以消除补体(Clq)结合位点； xi.亚部分i-x的组合。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种OPG融合蛋白的生产方法和用途，它为R1-L-R2形式，其中R1为OPG蛋白、其变体或片段，R2为Fc蛋白、其变体或片段；L为接头。本发明获得的融合蛋白可用于治疗骨质疏松和肿瘤相关骨损失等。 |
| 国际公布 |
