| 公开(公告)号 | CN1800202A |
| 公开(公告)日 | 2006.07.12 |
| 申请(专利)号 | CN200610037909.X |
| 申请日期 | 2006.01.20 |
| 专利名称 | 从心肌中提取纯化高铁肌红蛋白的方法 |
| 主分类号 | C07K1/14(2006.01)I |
| 分类号 | C07K1/14(2006.01)I;C07K14/805(2006.01)I |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 南京师范大学 |
| 发明(设计)人 | 金邦荃;汤祥明;刘兴余 |
| 地址 | 210097江苏省南京市宁海路122号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 南京知识律师事务所 |
| 代理人 | 卢亚丽 |
| 国省代码 | 江苏;32 |
| 主权项 | 一种从心肌中提取纯化高铁肌红蛋白的方法，包括以下步骤： 1)将新鲜动物心肌剁碎，加入冰冷的肌红蛋白萃取缓冲液，经匀浆、离心、过滤后得粗提液；所说的肌红蛋白萃取缓冲液是10mMTris-HCl，1mMEDTA，pH8.0； 2)粗提液经70％-100％硫酸铵盐析，得到的沉淀用平衡缓冲液A重悬，再加入过量的K3Fe(CN)6，离心后取上清液对平衡缓冲液A透析，透析膜的截留分子量为14000，得透析液；所说的平衡缓冲液A是10mMTris-HCl，1mMEDTA，10mMNaCl，pH8.5； 3)将透析液上样到DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换层析柱，用平衡缓冲液A洗脱，收集洗脱峰对应的红褐色洗液； 4)将收集的洗脱液泠冻干燥浓缩后，上样到SephacrylS-200HR凝胶过滤层析柱，用平衡缓冲液B洗脱，收集洗脱峰相对应的红褐色洗脱液，即得到纯化的高铁肌红蛋白；所说的平衡缓冲液B是100mMTris-HCl，100mMNaCl，pH7.5。 |
| 摘要 | 本发明涉及一种蛋白的提取纯化工艺，具体是从心肌中提取纯化高铁肌红蛋白的方法。具体的方法是：将新鲜动物心肌经前处理，萃取得到组织蛋白粗提物；粗提物再经硫酸铵盐析后，通过截留分子量为14000的透析处理得透析样品；将透析样品经DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析，收集红褐色洗脱液；收集的洗脱液再经Sephacryl S-200HR凝胶过滤层析，收集洗脱峰相对应的红褐色洗脱液，即得到纯化的高铁肌红蛋白。本发明方法具有产品纯度高，工艺简单、成本低等优点，既可填补我国该生物试剂制备的空白，又具有较高的经济价值。 |
| 国际公布 |
