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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:从心肌中提取纯化高铁肌红蛋白的方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

从心肌中提取纯化高铁肌红蛋白的方法

公开(公告)号 CN1800202A  
公开(公告)日 2006.07.12  
申请(专利)号 CN200610037909.X  
申请日期 2006.01.20  
专利名称 从心肌中提取纯化高肌红蛋白的方法  
主分类号 C07K1/14(2006.01)I  
分类号 C07K1/14(2006.01)I;C07K14/805(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 南京师范大学  
发明(设计)人 金邦荃;汤祥明;刘兴余  
地址 210097江苏省南京市宁海路122号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 南京知识律师事务所  
代理人 卢亚丽  
国省代码 江苏;32  
主权项 一种从心肌中提取纯化高铁肌红蛋白的方法,包括以下步骤: 1)将新鲜动物心肌剁碎,加入冰冷的肌红蛋白萃取缓冲液,经匀浆、离心、过滤后得粗提液;所说的肌红蛋白萃取缓冲液是10mMTris-HCl,1mMEDTA,pH8.0; 2)粗提液经70%-100%硫酸铵盐析,得到的沉淀用平衡缓冲液A重悬,再加入过量的K3Fe(CN)6,离心后取上清液对平衡缓冲液A透析,透析膜的截留分子量为14000,得透析液;所说的平衡缓冲液A是10mMTris-HCl,1mMEDTA,10mMNaCl,pH8.5; 3)将透析液上样到DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换层析柱,用平衡缓冲液A洗脱,收集洗脱峰对应的红褐色洗液; 4)将收集的洗脱液泠冻干燥浓缩后,上样到SephacrylS-200HR凝胶过滤层析柱,用平衡缓冲液B洗脱,收集洗脱峰相对应的红褐色洗脱液,即得到纯化的高铁肌红蛋白;所说的平衡缓冲液B是100mMTris-HCl,100mMNaCl,pH7.5。  
摘要 本发明涉及一种蛋白的提取纯化工艺,具体是从心肌中提取纯化高铁肌红蛋白的方法。具体的方法是:将新鲜动物心肌经前处理,萃取得到组织蛋白粗提物;粗提物再经硫酸铵盐析后,通过截留分子量为14000的透析处理得透析样品;将透析样品经DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换层析,收集红褐色洗脱液;收集的洗脱液再经Sephacryl S-200HR凝胶过滤层析,收集洗脱峰相对应的红褐色洗脱液,即得到纯化的高铁肌红蛋白。本发明方法具有产品纯度高,工艺简单、成本低等优点,既可填补我国该生物试剂制备的空白,又具有较高的经济价值。  
国际公布  
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