公开(公告)号
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CN1800382A
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公开(公告)日
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2006.07.12
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申请(专利)号
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CN200510000255.9
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申请日期
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2005.01.07
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专利名称
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重组人生肝素的制备方法及其在制备抗肝损伤药物中的用途
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主分类号
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C12N15/09(2006.01)I
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分类号
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C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/74(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;A61K38/17(2006.01)I;A61P1/16(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所;广州贝科能生物科技开发有限公司
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发明(设计)人
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杨晓明;曹传增;王清明;李 围;李永辉;詹轶群;许望翔;陈吉中
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地址
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100850北京市海淀区太平路27号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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北京;11
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主权项
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一种制备人生肝素(humanhepassocin,HPS)的方法,其特征为利用温度诱导型表达载体在原核细胞中实现HPS的高效表达,采用稀释方法在变性剂介导下实现HPS的体外复性,该方法包括: (1)将HPS的cDNA克隆到温度诱导型原核表达载体中,构建HPS表达载体; (2)用HPS表达载体转化感受态大肠杆菌,构建HPS基因表达工程菌; (3)30℃条件下培养HPS基因表达工程菌,42℃条件下诱导HPS表达; (4)分离HPS包涵体,用变性剂裂解HPS包涵体; (5)用稀释方法在变性剂介导下实现HPS的体外复性; (6)用QSepharoseFastFlow离子交换柱层析实现对HPS的纯化。
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摘要
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本发明为重组人生肝素(hepassocin,HPS)的制备方法及其在制备抗肝损伤药物中的应用,属生物产品的生产方法及用途领域。在获得人HPS cDNA之后,将此cDNA插入原核表达载体,构建原核高效表达工程菌,在此基础上建立了一套工程菌的诱导表达、包涵体的分离与裂解、HPS的体外复性和分离纯化工艺。利用此工艺能最终得到具有生物学活性的HPS纯品,实现HPS的工业化生产;本发明还提供了HPS在制备抗肝损伤药物中的用途。
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国际公布
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