| 公开(公告)号 | CN1255547C |
| 公开(公告)日 | 2006.05.10 |
| 申请(专利)号 | CN200410005408.4 |
| 申请日期 | 2004.02.18 |
| 专利名称 | 酿酒酵母重组乙型肝炎病毒表面抗原流加补料发酵工艺 |
| 主分类号 | C12P21/00(2006.01)I |
| 分类号 | C12P21/00(2006.01)I;C12R1/85(2006.01)N |
| 分案原申请号 | |
| 优先权 | |
| 申请(专利权)人 | 北京天坛生物制品股份有限公司;天津博荟生物技术有限公司 |
| 发明(设计)人 | 汪和睦;马民强;李 津;杨云凯 |
| 地址 | 100024中国北京市朝阳区三间房南里4号 |
| 颁证日 | |
| 国际申请 | |
| 进入国家日期 | |
| 专利代理机构 | 中原信达知识产权代理有限责任公司 |
| 代理人 | 丁业平;王维玉 |
| 国省代码 | 北京;11 |
| 主权项 | 一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的方法，其中所述的啤酒酵母工程菌的受体菌是亮氨酸营养缺陷型的；所述的啤酒酵母工程菌包含重组2μ质粒但不含天然的2μ质粒；所述重组2μ质粒包含编码乙肝表面抗原的基因，该基因的5’端和3’端分别与3-磷酸甘油醛脱氢酶启动子和乙醇脱氢酶I终止子可操作连接；所述重组2μ质粒还包含编码亮氨酸的基因，该基因的5’端和3’端分别与启动子和终止子可操作连接；该方法包括如下步骤： 1)所述啤酒酵母工程菌的种子培养步骤； 2)利用步骤1)制得的种子进行生产发酵的步骤；和 3)从步骤2)所得的发酵培养混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤； 该方法的特征在于，在上述步骤2)中以低于1.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加酵母浸出粉、以低于0.8克/升·小时的速率向发酵混合物中流加大豆蛋白胨或以低于3.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加碳源；将生产发酵结束时的酵母细胞密度控制在30克干重/升以下。 |
| 摘要 | 本发明公开了一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的方法，该方法包括如下步骤：1)所述啤酒酵母工程菌的种子培养步骤；2)利用步骤1)制得的种子进行生产发酵的步骤；和3)从步骤2所得的发酵培养混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤；该方法的特征在于，在上述步骤2)中以低于1.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加酵母浸出粉、以低于0.8克/升·小时的速率向发酵混合物中流加大豆蛋白胨或以低于3.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加碳源；将生产发酵结束时的酵母细胞密度控制在30克干重/升以下。 |
| 国际公布 |
