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酿酒酵母重组乙型肝炎病毒表面抗原流加补料发酵工艺

公开(公告)号 CN1255547C  
公开(公告)日 2006.05.10  
申请(专利)号 CN200410005408.4  
申请日期 2004.02.18  
专利名称 酵母重组乙型肝炎病毒表面抗原流加补料发酵工艺  
主分类号 C12P21/00(2006.01)I  
分类号 C12P21/00(2006.01)I;C12R1/85(2006.01)N  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 北京天坛生物制品股份有限公司;天津博荟生物技术有限公司  
发明(设计)人 汪和睦;马民强;李 津;杨云凯  
地址 100024中国北京市朝阳区三间房南里4号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 中原信达知识产权代理有限责任公司  
代理人 丁业平;王维玉  
国省代码 北京;11  
主权项 一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的方法,其中所述的啤酒酵母工程菌的受体菌是亮酸营养缺陷型的;所述的啤酒酵母工程菌包含重组2μ质粒但不含天然的2μ质粒;所述重组2μ质粒包含编码乙肝表面抗原的基因,该基因的5’端和3’端分别与3-磷酸甘油醛脱氢酶启动子和乙醇脱氢酶I终止子可操作连接;所述重组2μ质粒还包含编码亮氨酸的基因,该基因的5’端和3’端分别与启动子和终止子可操作连接;该方法包括如下步骤: 1)所述啤酒酵母工程菌的种子培养步骤; 2)利用步骤1)制得的种子进行生产发酵的步骤;和 3)从步骤2)所得的发酵培养混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤; 该方法的特征在于,在上述步骤2)中以低于1.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加酵母浸出粉、以低于0.8克/升·小时的速率向发酵混合物中流加大豆蛋白胨或以低于3.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加碳源;将生产发酵结束时的酵母细胞密度控制在30克干重/升以下。  
摘要 本发明公开了一种利用啤酒酵母工程菌生产乙肝表面抗原的方法,该方法包括如下步骤:1)所述啤酒酵母工程菌的种子培养步骤;2)利用步骤1)制得的种子进行生产发酵的步骤;和3)从步骤2所得的发酵培养混合物中分离纯化出乙肝表面抗原的步骤;该方法的特征在于,在上述步骤2)中以低于1.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加酵母浸出粉、以低于0.8克/升·小时的速率向发酵混合物中流加大豆蛋白胨或以低于3.0克/升·小时的速率向发酵混合物中流加碳源;将生产发酵结束时的酵母细胞密度控制在30克干重/升以下。  
国际公布  
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