公开(公告)号
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CN1253566C
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公开(公告)日
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2006.04.26
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申请(专利)号
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CN02136868.6
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申请日期
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2002.09.06
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专利名称
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一种青霉素酰化酶固定化载体的制备方法
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主分类号
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C12N11/08(2006.01)I
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分类号
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C12N11/08(2006.01)I;C08F20/00(2006.01)I;C08F2/18(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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华东理工大学
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发明(设计)人
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卢冠忠;薛 屏;乌云高娃;郭杨龙;王筠松
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地址
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200237上海市梅陇路130号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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中原信达知识产权代理有限责任公司
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代理人
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罗大忱
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种青霉素酰化酶固定化载体的制备方法,其特征在于包括如下步骤: (1)将表面活性剂溶解于分散相中; (2)将乙烯基化合物溶解于甲酰胺中或甲醇与水的混合物中,加热至45-75℃,加入偶氮二异丁腈,其用量为乙烯基化合物的0.806~1.04wt%; (3)将步骤(2)中的混合溶液转入步骤(1)的溶液中搅拌分散,在氮气保护下进行聚合,反应时间为3-8小时,反应结束后,从反应产物中收集珠状载体; 其中:分散相的质量为乙烯基化合物的1379.5~1693%,表面活性剂的质量为乙烯基化合物的67.9~81.3%; 所说的分散相选自环己烷或正庚烷与四氯乙烯的混合物中的一种,选用正庚烷与四氯乙烯的混合物时,正庚烷与四氯乙烯的体积比为: 正庚烷∶四氯乙烯=3.1∶1; 表面活性剂为司班-60和硬脂酸钙;司班-60和硬脂酸钙的质量比为: 司班-60∶硬脂酸钙1∶53.3~125; 乙烯基化合物选自N,N’-亚甲基双丙烯酰胺和甲基丙烯酸缩水甘油酯的组合物或N,N’-亚甲基双丙烯酰胺、甲基丙烯酸缩水甘油酯和丙烯酰胺的组合物; N,N’-亚甲基双丙烯酰胺与甲基丙烯酸缩水甘油酯的质量比为: N,N’-亚甲基双丙烯酰胺∶甲基丙烯酸缩水甘油酯=1.4∶1; N,N’-亚甲基双丙烯酰胺、甲基丙烯酸缩水甘油酯和丙烯酰胺的质量比为: N,N’-亚甲基双丙烯酰胺∶甲基丙烯酸缩水甘油酯∶丙烯酰胺=3.2∶2∶1。
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摘要
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本发明公开了一种青霉素酰化酶固定化载体的制备方法。本发明以表面活性剂作为分散剂,以乙烯基化合物为单体,采用反相悬浮技术进行交联聚合,从而获得青霉素酰化酶固定化载体。载体固定化青霉素酰化酶(IME)对青霉素G钾盐水解制备6-APA的表观酶活,可达125IU/g以上。本发明的方法所获得的含环氧基团聚合物珠状载体,表观酶活高,工艺过程简单,操作方便,原料价廉易得,易于工业化规模生产。
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国际公布
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