公开(公告)号
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CN1252262C
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公开(公告)日
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2006.04.19
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申请(专利)号
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CN200310105516.4
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申请日期
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2003.11.14
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专利名称
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双启动子DNA疫苗表达载体pCMVnir及其制备方法
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主分类号
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C12N15/09(2006.01)I
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分类号
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C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I;C12N15/53(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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山东大学
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发明(设计)人
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于修平;卞继峰;赵蔚明;耿 昭;周亚滨;贾继辉;栾 怡;齐 眉
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地址
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250012山东省济南市文化西路44号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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代理人
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国省代码
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山东;37
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主权项
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双启动子DNA疫苗表达载体pCMVnir,其特征在于为双股闭环DNA分子,是一种基因克隆的载体,长度为5.1Kb,用于表达制备基因工程产品和生产DNA疫苗,含有两种启动子,一种是真核细胞启动子HCMVIE启动子,另一种为大肠杆菌硝酸盐还原酶基因启动子nirB,分别在真核细胞和原核细胞中被激活表达相应的蛋白,含有多克隆酶切位点,用以插入外源基因,该载体具有SEQIDNO1所示的序列 (a)序列特征: 长度:5144碱基对 类型:核酸,1323A,1185C,1165G,1471T. 链型:双链 拓扑结构:环形 (b)分子类型:载体DNA (c)假设:否 (d)反义:否 tcctgcatcttttaatcaaatcccaagatgtgtataaacgcgccggtatgtacaggaaga60 ggtttatactaaactgttacattgcaaacgtggtttcgtgtgccaagtgtgaaaaccgat120 gtttaatcaaggctctgacgcatttctacaaccacgactccaagtgtgtgggtgaagtca180 tgcatcttttaatcaaatcccaagatgtgtataaaccaccaaactgccaaaaaatgaaaa240 ctgtcgacaagctctgtccgtttgctggcaactgcaagggtctcaatcctatttgtaatt300 attgaataataaaacaattataaatgtcaaatttgttttttattaacgatacaaaccaaa360 cgcaacaagaacatttgtagtattatctataattgaaaacgcgtagttataatcgctgag420 gtaatatttaaaatcattttcaaatgattcacagttaatttgcgacaatataattttatt480 ttcacataaactagacgccttgtcgtcttcttcttcgtattccttctctttttcattttt540 ctcttcataaaaattaacatagttattatcgtatccatatatgtatctatcgtatagagt600 aaattttttgttgtcataaatatatatgtcttttttaatggggtgtatagtaccgctgcg660 catagtttttctgtaatttacaacagtgctattttctggtagttcttcggagtgtgttgc720 tttaattattaaatttatataatcaatgaatttgggatcgtcggttttgtacaatatgtt780 gccggcatagtacgcagcttcttctagttcaattacaccattttttagcagcaccggatt840 aacataactttccaaaatgttgtacgaaccgttaaacaaaaacagttcacctcccttttc900 tatactattgtctgcgagcagttgtttgttgttaaaaataacagccattgtaatgagacg960 cacaaactaatatcacaaactggaaatgtctatcaatatatagttgctgatggccggcct1020 attaatagtaatcaattacggggtcattagttcatagcccatatatggagttccgcgtta1080 cataacttacggtaaatggcccgcctggctgaccgcccaacgacccccgcccattgacgt1140 caataatgacgtatgttcccatagtaacgccaatagggactttccattgacgtcaatggg1200 tggagtatttacggtaaactgcccacttggcagtacatcaagtgtatcatatgccaagtc1260 cgccccctattgacgtcaatgacggtaaatggcccgcctggcattatgcccagtacatga1320 ccttacgggactttcctacttggcagtacatctacgtattagtcatcgctattaccatgc1380 tgatgcggttttggcagtacaccaatgggcgtggatagcggtttgactcacggggatttc1440 caagtctccaccccattgacgtcaatgggagtttgttttggcaccaaaatcaacgggact1500 ttccaaaatgtcgtaataaccccgccccgttgacgcaaatgggcggtaggcgtgtacggt1560 gggaggtctatataagcagacgtcgtttagtgaaccgtcagatcactagatgctttattg1620 cggtagtttatcacagttaaattgctaacgccagtctcgaacttaacgtgcagaagttgg1680 tcgtgaggcactgggcaggtaagtatcgggccctttgtgcggggggagcggctcggggct1740 gtccgcggggggacggctgccttcgggggggacggggcagggcggggttcggcttctggc1800 gtgtgaccggcggctctagagcctctgctaaccatgttcatgccttcttctttttcctac1860 agctcctgggcaacgtgctggttattgtgctgtctcatcattttggcaaagaattggatc1920 ggaccgaggtaaatttgatgtacatcaaatggtaccccttgctgaatcgttaaggtaggc1980 ggtagggcccagatcttaatcatccacaggagatataccatggcacaccatcaccaccat2040 cactcttctggtaaagaaaccgctgctgcgaaatttgaacgccagcacatggactcgcca2100 ccgccttctggtctggtcccccggggcagcgcaggttctggtacgattgatgacgacgac2160 aagagtccgggcttctcctcaacgatatctgagctcgtggatccgaattctcagatctcg2220 gcgcgcctgcaggtcgacggtaccggttcgaagcttgcggccgcacagctgtatacacgt2280 gcaagccagccagaactcgccccggaagaccccgaggatctcgagcaccaccatcaccat2340 caccatcactaagtgattaacctcaggtgcaggctgcctatcagaaggtggtggctggtg2400 tggccaatgccctggctcacaaataccactgagatcgatctttttccctctgccaaaaat2460 tatggggacatcatgaagccccttgagcatctgacttctggctaataaaggaaatttatt2520 ttcattgcaatagtgtgttggaattttttgtgtctctcactcggaaggacatatgggagg2580 gcaaatcatttaaaacatcagaatgagtatttggtttagagtttggcaacatatgcccat2640 atgtaactagcataaccccttggggcctctaaacgggtcttgaggggttttttgctgaaa2700 gcatgcggaggaaattctccttgaagtttccctggtgttcaaagtaaaggagtttgcacc2760 agacgcacctctgttcactggtccggcgtattaaaacacgatacattgttattagtacat2820 ttattaagcgctagattctgtgcgttgttgatttacagacaattgttgtacgtattttaa2880 taattcattaaatttataatctttagggtggtatgttagagcgaaaatcaaatgattttc2940 agcgtctttatatctgaatttaaatattaaatcctcaatagatttgtaaaataggtttcg3000 attagtttcaaacaagggttgtttttccgaaccgatggctggactatctaatggattttc3060 gctcaacgccacaaaacttgccaaatcttgtagcag
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摘要
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双启动子DNA疫苗表达载体pCMVnir及其制备方法,属于DNA疫苗技术领域。双启动子DNA疫苗表达载体pCMVnir为双股闭环DNA分子,是一种基因克隆的载体,长度为5.1Kb,用于表达制备基因工程产品和生产DNA疫苗,含有两种启动子,一种是真核细胞启动子HCMV IE启动子,另一种为大肠杆菌硝酸盐还原酶基因启动子nirB,分别在真核细胞和原核细胞中被激活表达相应的蛋白,含有多克隆酶切位点,用以插入外源基因,该载体具有SEQ ID NO 1所示的序列。本发明的疫苗载体可用于高效表达外源基因,而不需要在培养体系中加入诱导剂。
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国际公布
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