公开(公告)号
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CN1760208A
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公开(公告)日
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2006.04.19
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申请(专利)号
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CN200410046844.6
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申请日期
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2004.10.15
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专利名称
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一种人野生型P53融合蛋白
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主分类号
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C07K19/00(2006.01)I
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分类号
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C07K19/00(2006.01)I;C12N15/62(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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苏先狮
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发明(设计)人
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苏先狮;龚国忠
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地址
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410011湖南省长沙市人民中路86号中南大学湘雅二医院肝病研究所
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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湖南兆弘专利事务所
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代理人
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张美娟
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国省代码
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湖南;43
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主权项
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一种人野生型P53融合蛋白,其特征在于该融合蛋白的cDNA的核苷酸序列和相应的编码氨基酸序列如下: gggatccggcgtcgtcagcagcgacgtaaaaagaggatggaggagccg48 GlyIleArgArgArgGlnGlnArgArgLysLysArgMetGluGluPro 151015 cagtcagatcctagcgtcgagccccctctgagtcaggaaacattttca96 GlnSerAspProSerValGluProProLeuSerGlnGluThrPheSer 202530 gacctatggaaactacttcctgaaaacaacgttctgtcccccttgccg144 AspLeuTrpLysLeuLeuProGluAsnAsnValLeuSerProLeuPro 354045 tcccaagcaatggatgatttgatgctgtccccggacgatattgaacaa192 SerGlnAlaMetAspAspLeuMetLeuSerProAspAspIleGluGln 505560 tggttcactgaagacccaggtccagatgaagctcccagaatgccagag240 TrpPheThrGluAspProGlyProAspGluAlaProArgMetProGlu 65707580 gctgctccccccgtggcccctgcaccagcagctcctacaccggcggcc288 AlaAlaProProValAlaProAlaProAlaAlaProThrProAlaAla 859095 cctgcaccagccccctcctggcccctgtcatcttctgtcccttcccag336 ProAlaProAlaProSerTrpProLeuSerSerSerValProSerGln 100105110 aaaacctaccagggcagctacggtttccgtctgggcttcttgcattct384 LysThrTyrGlnGlySerTyrGlyPheArgLeuGlyPheLeuHisSer 115120125 gggacagccaagtctgtgacttgcacgtactcccctgccctcaacaag432 GlyThrAlaLysSerValThrCysThrTyrSerProAlaLeuAsnLys 130135140 atgttttgccaactggccaagacctgccctgtgcagctgtgggttgat480 MetPheCysGlnLeuAlaLysThrCysProValGlnLeuTrpValAsp 145150155160 tccacacccccgcccggcacccgcgtccgcgccatggccatctacaag528 SerThrProProProGlyThrArgValArgAlaMetAlaIleTyrLys 165170175 cagtcacagcacatgacggaggttgtgaggcgctgcccccaccatgag576 GlnSerGlnHisMetThrGluValValArgArgCysProHisHisGlu 180185190 cgctgctcagatagcgatggtctggcccctcctcagcatcttatccga624 ArgCysSerAspSerAspGlyLeuAlaProProGlnHisLeuIleArg 195200205 gtggaaggaaatttgcgtgtggagtatttggatgacagaaacactttt672 ValGluGlyAsnLeuArgValGluTyrLeuAspAspArgAsnThrPhe 210215220 cgacatagtgtggtggtgccctatgagccgcctgaggttggctctgac720 ArgHisSerValValValProTyrGluProProGluValGlySerAsp 225230235240 tgtaccaccatccactacaactacatgtgtaacagttcctgcatgggc768 CysThrThrIleHisTyrAsnTyrMetCysAsnSerSerCysMetGly 245250255 ggcatgaaccggaggcccatcctcaccatcatcacactggaagactcc816 GlyMetAsnArgArgProIleLeuThrIleIleThrLeuGluAspSer 260265270 agtggtaatctactgggacggaacagctttgaggtgcgtgtttgtgcc864 SerGlyAsnLeuLeuGlyArgAsnSerPheGluValArgValCysAla 275280285 tgtcctgggagagaccggcgcacagaggaagagaatctccgcaagaaa912 CysProGlyAsgAspArgThgThrGluGluGluAsnLeuArgLysLys 290295300 ggggagcctcaccacgagctgcccccagggagcactaagcgagcactg960 GlyGluProHisHisGluLeuProProGlySerThrLysArgAlaLeu 305310315320 cccaacaacaccagctcctctccccagccaaagaagaaaccactggat1008 ProAsnAsnThrSerSerSerProGlnProLysLysLysProLeuAsp 325330335 ggagaatatttcacccttcagatccgtgggcgtgagcgcttcgagatg1056 GlyGluTyrPheThrLeuGlnIleArgGlyArgGluArgPheGluMet 340345350 ttccgagagctgaatgaggccttggaactcaaggatgcccaggctggg1104 PheArgGluLeuAsnGluAlaLeuGluLeuLysAspAlaGlnAlaGly 355360365 aaggagccaggggggagcagggctcactccagccacctgaagtccaaa1152 LysGluProGlyGlySerArgAlaHisSerSerHisLeuLysSerLys 370375380 aagggtcagtctacctcccgccataaaaaactcatgttcaagacagaa1200 LysGlyGlnSerThrSerArgHisLysLysLeuMetPheLysThrGlu 385390395400 gggcctgactcagactga1218 GlyProAspSerAsp--- 405
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摘要
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本发明涉及一种P53融合蛋白。本发明将人wtP53基因cDNA片段和蛋白传导结构域(PTD)融合,插入到大肠杆菌原核表达载体PGEX-3X中,得到重组表达质粒PGEX-3X-P53,利用IPTG诱导产生wtP53融合蛋白;分子量约为53kbp,经DNA序列测定,它由1218个核苷酸组成;经MTT法及TUMEL法体外实验,表明wtP53融合蛋白可明显抑制肺癌细胞H1299和肝癌细胞HePG2的增殖,促进其调亡,本发明为应用wtP53融合蛋白治疗肿瘤提供了可靠的途径。
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国际公布
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