公开(公告)号 | CN1245510C |
公开(公告)日 | 2006.03.15 |
申请(专利)号 | CN03151203.8 |
申请日期 | 2003.09.25 |
专利名称 | 长效重组组织因子途径抑制物及其制备方法 |
主分类号 | C12N15/12(2006.01)I |
分类号 | C12N15/12(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 复旦大学 |
发明(设计)人 | 马 端;宋后燕;白 浩;张 农 |
地址 | 200433上海市邯郸路220号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 上海正旦专利代理有限公司 |
代理人 | 包兆宜 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种重组组织因子途径抑制物长效突变体,其氨基酸序列是将野生型组织因子途径抑制物的282位赖氨酸替换为丙氨酸后得到的序列。 |
摘要 | 本发明属生物技术领域,具体涉及长效组织因子途径抑制物(LTFPI)及其制备方法和应用。本发明对组织因子途径抑制物(TFPI)及其受体低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的生物信息学和结构分子生物学分析和实验,确定了TFPI羧基末端与LRP结合并被清除的部位。设计了TFPI羧基末端突变体,通过PCR定点突变构建LTFPI基因后,与原核或真核表达载体重组,转化大肠杆菌或毕赤酵母,筛选高表达工程菌。原核工程菌经发酵扩增,破碎细菌,离心收集包涵体,复性后经分子筛和离子交换二步法纯化LTFPI;真核工程菌直接将上清进行二步纯化。获得的LTFPI半衰期明显延长,具有良好的抗凝功能。 |
国际公布 |