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您现在的位置: 医学全在线 >> 药学理论 >> 中国药品专利文献 >> 正文:自体胸水上清培养TIL细胞的方法专利检索:专利号/专利人/发明人
    

自体胸水上清培养TIL细胞的方法

公开(公告)号 CN1244691C  
公开(公告)日 2006.03.08  
申请(专利)号 CN200410014095.9  
申请日期 2004.02.18  
专利名称 自体胸水上清培养TIL细胞的方法  
主分类号 C12N5/08(2006.01)I  
分类号 C12N5/08(2006.01)I  
分案原申请号  
优先权  
申请(专利权)人 南京大学医学院附属鼓楼医院  
发明(设计)人 刘宝瑞;邹征云  
地址 210008江苏省南京市中山路321号  
颁证日  
国际申请  
进入国家日期  
专利代理机构 南京苏科专利代理有限责任公司  
代理人  
国省代码 江苏;32  
主权项 自体胸水上清培养TIL细胞的方法,无菌收集癌性胸水,离心后保存上清,用淋巴细胞分离液分离下层细胞,去除下层细胞中的红细胞、坏死组织碎片,其特征在于 (1)将上清留作培养基; (2)取下层细胞中的白膜层细胞至上清培养基培养; (3)12~24小时后,肿瘤细胞全部贴壁,悬浮的是TIL细胞; (4)将浓度在5×105/ml~1×106/ml的TIL细胞置于饱和湿度、5%二化碳孵箱内培养,温度控制在37℃内; (5)1天后,加入终浓度50~100ng/ml的OKT3、800~6000U/ml的IL-2、50~100ug/ml的PHA; (6)隔1~2天,加入含800~6000U/ml的IL-2的完全培养基进行培养。  
摘要 本发明涉及一种利用自体胸水上清进行TIL细胞的培养方法。本发明采用将收集的癌性胸水离心后保存上清,用作培养基,将下层细胞中的白膜层细胞至该上清培养基中培养,得悬浮的TIL细胞,再至孵箱内培养,1天后加入OKT3、IL-2、PHA等,1、2天再加入IL-2进行培养。本发明的实验数据表明该方法是可行的,与现有方法相比,某些方面相同,某些方面更优。而本发明却避免了现有方法使用人AB血清可能导致的乙肝、爱滋病等传染,体外培养时间过长所增加的污染机率,以及培养时间过长增加病人负担,延长治疗时间和成本增加等缺陷。  
国际公布  
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