公开(公告)号
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CN100345971C
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公开(公告)日
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2007.10.31
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申请(专利)号
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CN03141577.6
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申请日期
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2003.07.14
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专利名称
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重组人干细胞因子的原核表达载体、工程菌及制备方法
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主分类号
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C12N15/70(2006.01)I
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分类号
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C12N15/70(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/715(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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第二军医大学免疫学研究所
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发明(设计)人
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陈国友;蒋应明;黄 欣;张 意;卢 琳;施群英;曹雪涛
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地址
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200433上海市杨浦区翔殷路800号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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上海专利商标事务所有限公司
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代理人
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徐 迅
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国省代码
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上海;31
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主权项
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一种用于重组表达人干细胞因子的原核表达载体,其特征在于,所述的载体含有人干细胞因子表达盒以及与所述表达盒操作性相连的启动子,所述的表达盒从5’至3’依次具有:序列为TTAACTTTA的增强子、长度为14±2bp的上游间隔序列、和人干细胞因子的编码序列、终止密码子;其中所述的上游间隔序列具有SEQIDNO:7中第10-23位的序列。
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摘要
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本发明涉及高效表达重组人干细胞因子(rhSCF)的表达载体、工程菌及制备方法。本发明还提供了通过优选的培养基成分及优化发酵参数,建立了工程菌高密度发酵方法。还提供了通过包涵体变性、蛋白复性、色谱分离制备高纯度重组人干细胞因子的方法。本发明中构建的重组人干细胞因子表达工程菌具有表达量高,表达稳定等优点,所采取的纯化工艺稳定可靠,得率高,利于大规模生产。
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国际公布
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