公开(公告)号 | CN100342007C |
公开(公告)日 | 2007.10.10 |
申请(专利)号 | CN00111627.4 |
申请日期 | 2000.01.28 |
专利名称 | 一种新型重组葡激酶及其制备方法 |
主分类号 | C12N9/14(2006.01)I |
分类号 | C12N9/14(2006.01)I;C12N15/58(2006.01)I |
分案原申请号 | |
优先权 | |
申请(专利权)人 | 复旦大学 |
发明(设计)人 | 宋后燕;宋 钢 |
地址 | 200032上海市医学院路138号 |
颁证日 | |
国际申请 | |
进入国家日期 | |
专利代理机构 | 上海正旦专利代理有限公司 |
代理人 | 包兆宜 |
国省代码 | 上海;31 |
主权项 | 一种重组突变葡激酶,其特征在于改变野生型葡激酶二聚体结合面,将野生型葡激酶肽链的Lys109-Gly110-Phe111替换为Arg109-Gly110-Asp111,制备重组突变葡激酶。 |
摘要 | 本发明属生物技术领域,具体涉及一种低聚合能力兼具防栓功能的新型重组葡激酶(RGD/KGD-Sak)的蛋白质结构和制备方法。根据对重组葡激酶单体、二聚体三维结构及其生化特性的分析,设计了新型葡激酶分子结构。通过PCR定点突变构建突变体RGD/KGD-Sak基因,然后与原核表达载体pLY-4重组,转化大肠杆菌,筛选高表达工程菌。工程菌经发酵扩增,破碎细菌,离心收集包涵体,复性后经二步法纯化RGD/KGD-Sak。所得产品冻干后,形成聚合体的能力显著下降,并能显著抑制ADP诱导的血小板的聚集,具有溶栓、防栓双重功能。 |
国际公布 |