公开(公告)号
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CN100338212C
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公开(公告)日
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2007.09.19
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申请(专利)号
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CN03110980.2
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申请日期
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2003.01.29
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专利名称
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人组织激肽释放酶的微囊化细胞及其微囊化方法和应用
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主分类号
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C12N5/00(2006.01)I
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分类号
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C12N5/00(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N9/50(2006.01)I;C12N15/57(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/861(2006.01)I;C12N11/02(2006.01)I;A61K38/48(2006.01)I;A61K35/12(2006.01)I;A61K9/48(2006.01)I;A61P9/12(2006.01)I;A61P13/12(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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中国科学院大连化学物理研究所
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发明(设计)人
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张玉奎;于晓明;张维冰;杨 青;徐茂兰
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地址
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116023辽宁省大连市中山路457号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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沈阳科苑专利商标代理有限公司
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代理人
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许宗富;周秀梅
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国省代码
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辽宁;21
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主权项
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一种人组织激肽释放酶的微囊化细胞的微囊化方法,其特征在于:1)构建组织激肽释放酶腺病毒表达载体;2)重组腺病毒Ad.CMV-cHK转染细胞;具体为:将0.1~1×107pfu的病毒加入到1~2×106个/mL细胞培养液中,混匀,病毒即吸附到细胞表面,进入细胞内;3)细胞的微囊化操作;具体为:挑选生长良好并高表达人组织激肽释放酶的小鼠成纤维细胞进行微囊化处理,取0.5~2×107细胞与1毫升12~16g/L海藻酸钠,充分混匀,以压缩氮气将此混合物通过针头喷洒入100mM氯化钙溶液中,形成珠状的海藻酸钠钙凝胶颗粒,收集颗粒,用分子量24kDaSigma0.4~0.6g/L多聚赖氨酸处理5~8分钟,再用3~5g/L海藻酸钠处理2~4分钟,生理盐水洗涤,最后用pH7.410mM柠檬酸钠液化微胶囊核心海藻酸钙,培养于DMEM+10%胎牛血清培养液中培养。
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摘要
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本发明涉及人组织激肽释放酶,具体地说是人组织激肽释放酶的微囊化细胞及其微囊化方法和应用;在基因修饰的表达人组织激肽释放酶的细胞上包覆着具有刚性和双向流通性的包膜材料;应用于治疗高血压和/或肾脏疾病中;本发明具有如下优点:1.适于临床需要;2.适于实际应用;3.应用效果明显;4.方法确实可行。
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国际公布
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