公开(公告)号
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CN1303104C
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公开(公告)日
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2007.03.07
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申请(专利)号
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CN200310106596.5
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申请日期
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2003.12.08
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专利名称
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一种蛋白酶A抑制剂的提取方法及应用
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主分类号
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C07K14/81(2006.01)I
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分类号
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C07K14/81(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I;C12C5/02(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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申请(专利权)人
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江南大学
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发明(设计)人
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田亚平;顾国贤;章克昌;李屹松;周楠迪
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地址
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214036江苏省无锡市惠河路170号
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颁证日
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国际申请
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进入国家日期
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专利代理机构
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无锡市大为专利商标事务所
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代理人
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时旭丹
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国省代码
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江苏;32
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主权项
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一种蛋白酶A抑制剂的分离提取方法,其特征是从灵芝液体深层发酵的发酵液中,通过乙醇分级沉淀或膜过滤分级获得粗蛋白酶A抑制剂;再经过分子筛凝胶层析后,收集分子量30KD~40KD部分冻干,即获得精制蛋白酶A抑制剂;A)灵芝发酵液的处理:灵芝液体深层发酵的发酵液离心除去菌丝体,上清液浓缩2~3倍;B)乙醇分级沉淀或膜过滤分级;对灵芝液体深层发酵液进行乙醇分级沉淀的处理工艺为:发酵液中先加入乙醇达30%~50%终浓度,离心后的清液中继续加乙醇达60%~80%终浓度,离心得沉淀,真空冷冻干燥得冻干粉即为粗蛋白酶A抑制剂;或膜过滤分级:利用截留5万~3万分子量超滤膜进行膜过滤得分子量在3~5万之间的部分为粗蛋白酶A抑制剂;C)分子筛凝胶层析:采用0.01~0.05mol/L磷酸缓冲液做洗脱剂,洗脱流速为0.5~0.8ml/min,柱尺寸H/D在30~50之间,得精制的蛋白酶A抑制剂。
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摘要
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一种蛋白酶A抑制剂的提取方法及应用,涉及从灵芝深层发酵液或灵芝发酵全粉中提取一种蛋白酶A(PrA)抑制剂及应用。从灵芝发酵液或发酵全粉的抽提液中通过乙醇分级或膜过滤分级得粗PrA抑制剂,再经分子筛层析收集30KD~40KD部分冻干得精制PrA抑制剂。该抑制剂可应用于纯生啤酒的生产中。本发明优点是原料灵芝发酵液或发酵全粉可工业化生产,提取工艺简便、设备投入少、抑制剂成本低;其应用属于一种后修饰手段,适量添加可提高纯生啤酒泡沫稳定性,抑制效果高,添加量较为灵活,对啤酒的色度、风味、澄清度等品质没有影响;抑制剂成分主要是蛋白质、多糖及糖蛋白,其中的高分子多糖不仅对啤酒的泡沫有利,还具一定的保健作用。
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国际公布
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