公开(公告)号
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CN100335625C
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公开(公告)日
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2007.09.05
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申请(专利)号
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CN97194755.4
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申请日期
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1997.03.24
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专利名称
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来自有蹄动物胚胎的培养内细胞团细胞系
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主分类号
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C12N15/00(2006.01)I
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分类号
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C12N15/00(2006.01)I;C12N5/00(2006.01)I
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分案原申请号
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优先权
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1996.4.1 US 08/626,054
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申请(专利权)人
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马萨诸塞大学马萨诸塞州高等教育公立研究所
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发明(设计)人
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S·L·斯蒂克;P·J·戈卢克
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地址
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美国马萨诸塞州
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颁证日
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国际申请
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1997-03-24 PCT/US1997/004736
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进入国家日期
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1998.11.19
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专利代理机构
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中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
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代理人
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黄革生
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国省代码
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美国;US
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主权项
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用于产生有蹄类培养内细胞团CICM细胞的方法,该方法包括以下步骤:(i)由有蹄类胚泡获取内细胞团ICM或由有蹄类前胚泡期胚胎获取ICM祖细胞;(ii)在可保证形成多层细胞集落的条件下,于饲养层培养物上培养所说的ICM或ICM祖细胞;(iii)从包含于培养的ICM或ICM祖细胞集落内的细胞中鉴别出具有以下特性的细胞:(a)细胞质/细胞核的体积比例较小,为大约10/90-50/50;(b)具有胞质小泡;(c)单个细胞较小,直径为大约10-20μm;(iv)将一个或一群所说的鉴定好的细胞与细胞集落的余下部分分离开;和(v)在可使饲养细胞层与分离细胞或细胞群之间至少存在一些物理接触的条件下,将所说的已分离的ICM细胞或ICM祖细胞传代到另一饲养层培养物上,以产生CICM细胞。
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摘要
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本发明提供了来自有蹄动物尤其是猪和牛的新的培养内细胞团细胞和细胞系,以及它们的制备方法。在延长培养期间,本发明中的培养内细胞团(CICM)具有与未分化的发育中胚胎的内细胞团相似的形态,还与其相同或基本相似地表达细胞标记。可将异源DNA导入本发明的培养内细胞团(CICM)细胞和细胞系中以产生对转基因胚胎、胎儿和/或后代生产有用的转基因细胞,例如,通过核移植方法。
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国际公布
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1997-10-09 WO1997/037009 英
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